CERV-186

La lignée cellulaire CERV-186, dérivée in vitro d’une xénogreffe du carcinome cervical MRI-H-186, sert de modèle biologique pour le carcinome épidermoïde invasif à grandes cellules non kératinisant. Cette lignée cellulaire a été établie et adaptée à la transplantation in vivo sous la direction du Dr Bodgen à l’Institut de recherche Mason. Caractérisée par ses propriétés génomiques, la lignée MRI-H186 contient environ 26 copies intégrées du génome du VPH16, sous forme complète et tronquée, ce qui influence considérablement son profil transcriptomique.

Les cellules MRI-H186 se distinguent par leur forte expression des transcrits précoces du HPV16, tant complets que tronqués, affichant notamment des niveaux élevés d’ARN E5 complet (fl). Cette signature transcriptionnelle se distingue nettement de celle observée dans d’autres lignées cellulaires de carcinome cervical telles que CaSki et MRI-H196. De plus, l’activité transcriptionnelle de MRI-H186, en termes d’expression de divers autres transcrits, présente une grande similitude avec les profils observés dans les lignées cellulaires HPK-IA et C3, ce qui indique un comportement transcriptionnel similaire entre ces modèles. La présence d’intégrations génomiques à la fois complètes et tronquées du VPH16 dans les cellules MRI-H186 est un facteur clé de leur expression vigoureuse des transcrits viraux précoces, particulièrement mise en évidence par l’expression significative de l’ARN E5 fl. Cette intense activité transcriptionnelle culmine au niveau du signal de polyadénylation précoce, mettant en évidence la dynamique transcriptionnelle unique au sein de la lignée cellulaire MRI-H186.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.