.jpg)
- Tissue
- ปากมดลูก
- Disease
- มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
- Synonyms
- Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186
Documents
CERV-186
Cell line · Product number 300290
The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...
Customization / Recommendations
- CERV-186Cell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
สายเซลล์ CERV-186 ซึ่งได้มาจากการปลูกถ่ายข้ามสายพันธุ์ในหลอดทดลองของมะเร็งปากมดลูก MRI-H-186 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองทางชีวภาพสำหรับมะเร็งเซลล์สความัสชนิดไม่เกิดการเคอราไทไนซ์ขนาดใหญ่ที่ลุกลาม สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นและปรับให้เหมาะสมสำหรับการปลูกถ่ายในสิ่งมีชีวิตภายใต้การดูแลของ ดร. บอดเจน ที่สถาบันวิจัยเมสันMRI-H186 มีลักษณะเด่นด้วยคุณสมบัติทางจีโนม โดยประกอบด้วยสำเนาของจีโนม HPV16 ทั้งแบบเต็มรูปแบบและแบบตัดทอนที่ผสานรวมอยู่ประมาณ 26 ชุด ซึ่งส่งผลอย่างมีนัยสำคัญต่อโปรไฟล์ทรานสคริปโตมิกของมัน
เซลล์ MRI-H186 โดดเด่นด้วยการแสดงออกของทรานสคริปต์ HPV16 ทั้งแบบเต็มความยาวและแบบตัดตอนในช่วงต้นอย่างเข้มข้น โดยเฉพาะการแสดงออกของ RNA แบบเต็มความยาวของ E5 (fl) ในระดับสูง ลักษณะเฉพาะของการถอดรหัสนี้แตกต่างอย่างชัดเจนจากเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์อื่น เช่น CaSki และ MRI-H196นอกจากนี้ กิจกรรมในการถอดรหัสของ MRI-H186 ในแง่ของการแสดงออกของทรานสคริปต์อื่นๆ อีกหลายชนิด แสดงให้เห็นความสอดคล้องอย่างใกล้ชิดกับรูปแบบที่สังเกตได้ในเซลล์ไลน์ HPK-IA และ C3 ซึ่งบ่งชี้ถึงพฤติกรรมในการถอดรหัสที่คล้ายคลึงกันในโมเดลเหล่านี้การมีอยู่ของทั้งการรวมตัวของจีโนม HPV16 แบบเต็มความยาวและแบบตัดทอนในเซลล์ MRI-H186 เป็นปัจจัยสำคัญที่ทำให้เกิดการแสดงออกของทรานสคริปต์ไวรัสระยะแรกอย่างเข้มข้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เห็นได้ชัดจากการแสดงออกของ E5 fl RNA อย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรมในการถอดรหัสที่รุนแรงนี้สิ้นสุดลงที่สัญญาณโพลีอะดีนิเลชันในระยะแรก ซึ่งเน้นย้ำถึงพลวัตการถอดรหัสที่เป็นเอกลักษณ์ภายในสายพันธุ์เซลล์ MRI-H186
- Tissue
- ปากมดลูก
- Disease
- มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
- Synonyms
- Cerv-186
- MRI-H-186
- MRI-H186
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
04Identifiers
- Citation
- CERV-186 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300290)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5720
05Expression and susceptibility
- Viruses
- HPV-16 เป็นบวก
- Products
- ไซโตเคราติน 8, 18, วิเมนติน, เดสมอพลาคิน
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 2 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 7 วัน
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 42 ปี
- Ethnicity
- แอฟริกัน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes