Skip to content
CERV-186
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Documents

CERV-186

Cell line · Product number 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายเซลล์ CERV-186 ซึ่งได้มาจากการปลูกถ่ายข้ามสายพันธุ์ในหลอดทดลองของมะเร็งปากมดลูก MRI-H-186 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองทางชีวภาพสำหรับมะเร็งเซลล์สความัสชนิดไม่เกิดการเคอราไทไนซ์ขนาดใหญ่ที่ลุกลาม สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นและปรับให้เหมาะสมสำหรับการปลูกถ่ายในสิ่งมีชีวิตภายใต้การดูแลของ ดร. บอดเจน ที่สถาบันวิจัยเมสันMRI-H186 มีลักษณะเด่นด้วยคุณสมบัติทางจีโนม โดยประกอบด้วยสำเนาของจีโนม HPV16 ทั้งแบบเต็มรูปแบบและแบบตัดทอนที่ผสานรวมอยู่ประมาณ 26 ชุด ซึ่งส่งผลอย่างมีนัยสำคัญต่อโปรไฟล์ทรานสคริปโตมิกของมัน

เซลล์ MRI-H186 โดดเด่นด้วยการแสดงออกของทรานสคริปต์ HPV16 ทั้งแบบเต็มความยาวและแบบตัดตอนในช่วงต้นอย่างเข้มข้น โดยเฉพาะการแสดงออกของ RNA แบบเต็มความยาวของ E5 (fl) ในระดับสูง ลักษณะเฉพาะของการถอดรหัสนี้แตกต่างอย่างชัดเจนจากเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์อื่น เช่น CaSki และ MRI-H196นอกจากนี้ กิจกรรมในการถอดรหัสของ MRI-H186 ในแง่ของการแสดงออกของทรานสคริปต์อื่นๆ อีกหลายชนิด แสดงให้เห็นความสอดคล้องอย่างใกล้ชิดกับรูปแบบที่สังเกตได้ในเซลล์ไลน์ HPK-IA และ C3 ซึ่งบ่งชี้ถึงพฤติกรรมในการถอดรหัสที่คล้ายคลึงกันในโมเดลเหล่านี้การมีอยู่ของทั้งการรวมตัวของจีโนม HPV16 แบบเต็มความยาวและแบบตัดทอนในเซลล์ MRI-H186 เป็นปัจจัยสำคัญที่ทำให้เกิดการแสดงออกของทรานสคริปต์ไวรัสระยะแรกอย่างเข้มข้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เห็นได้ชัดจากการแสดงออกของ E5 fl RNA อย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรมในการถอดรหัสที่รุนแรงนี้สิ้นสุดลงที่สัญญาณโพลีอะดีนิเลชันในระยะแรก ซึ่งเน้นย้ำถึงพลวัตการถอดรหัสที่เป็นเอกลักษณ์ภายในสายพันธุ์เซลล์ MRI-H186

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
CERV-186 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300290)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Expression and susceptibility

Viruses
HPV-16 เป็นบวก
Products
ไซโตเคราติน 8, 18, วิเมนติน, เดสมอพลาคิน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 7 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
42 ปี
Ethnicity
แอฟริกัน