Prejsť na obsah
CERV-186
Tkanivo
Cervix
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Dokumenty

CERV-186

Cell line · Číslo výrobku 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia CERV-186, odvodená in vitro z xenotransplantátu karcinómu krčka maternice MRI-H-186, slúži ako biologický model pre invazívny veľkobunkový nekeratinizujúci spinocelulárny karcinóm. Táto bunková línia bola vytvorená a prispôsobená na transplantáciu in vivo pod vedením Dr. Bodgena v Mason Research Institute. MRI-H186, charakterizovaná svojimi genomickými vlastnosťami, obsahuje približne 26 integrovaných kópií genómu HPV16 v plnej dĺžke aj skrátených foriem, ktoré významne ovplyvňujú jej transkriptomický profil.

Bunky MRI-H186 sa vyznačujú silnou expresiou transkriptov HPV16 v plnej aj skrátenej dĺžke, pričom vykazujú najmä vysoké hladiny RNA E5 v plnej dĺžke (fl). Tento transkripčný podpis sa výrazne líši od transkripčného podpisu pozorovaného v iných bunkových líniách karcinómu krčka maternice, ako sú CaSki a MRI-H196. Okrem toho transkripčná aktivita MRI-H186, pokiaľ ide o expresiu rôznych iných transkriptov, vykazuje blízku zhodu so vzormi pozorovanými v bunkových líniách HPK-IA a C3, čo naznačuje podobné transkripčné správanie v týchto modeloch. Prítomnosť genomických integrácií HPV16 v plnej dĺžke aj skrátených integrácií HPV16 v bunkách MRI-H186 je kľúčovým faktorom ich intenzívnej expresie skorých vírusových transkriptov, čo podčiarkuje najmä výrazná expresia fl RNA E5. Táto intenzívna transkripčná aktivita vrcholí pri signáli včasnej polyadenylácie, čo zdôrazňuje jedinečnú transkripčnú dynamiku v rámci bunkovej línie MRI-H186.

Tkanivo
Cervix
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
CERV-186 (katalógové číslo Cytion 300290)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
HPV-16 pozitívny
Produkty
Cytokeratín 8, 18, Vimentín, Desmoplakin

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buniek/cm2 bude mať za následok konfluentnú monovrstvu do 7 dní.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
42 rokov
Etnická príslušnosť
African