CERV-186

Клетъчната линия CERV-186, получена in vitro от ксенотрансплантация на цервикален карцином MRI-H-186, служи като биологичен модел за инвазивен, едроклетъчен, некератинизиращ плоскоклетъчен карцином. Тази клетъчна линия е създадена и адаптирана за in vivo трансплантация под ръководството на д-р Бодген в Изследователския институт Мейсън. Характеризирайки се с геномните си свойства, MRI-H186 съдържа приблизително 26 интегрирани копия както на пълнодълго, така и на съкратени форми на генома на HPV16, които значително влияят на транскриптомния му профил.

Клетките MRI-H186 се отличават със силна експресия на ранни транскрипти на HPV16 с пълна дължина и на съкратени транскрипти, като по-специално показват високи нива на РНК E5 с пълна дължина (fl). Този транскрипционен подпис се различава значително от този, наблюдаван при други клетъчни линии на цервикален карцином, като CaSki и MRI-H196. Освен това транскрипционната активност на MRI-H186 по отношение на експресията на различни други транскрипти показва близко съответствие с моделите, наблюдавани при клетъчните линии HPK-IA и C3, което показва сходно транскрипционно поведение при тези модели. Наличието както на геномни интеграции с пълна дължина, така и на съкратени HPV16 в клетките MRI-H186 е ключов фактор за тяхната енергична експресия на ранни вирусни транскрипти, особено подчертана от значителната експресия на Е5 fl РНК. Тази интензивна транскрипционна активност завършва при сигнала за ранно полиаденилиране, което подчертава уникалната транскрипционна динамика в рамките на клетъчната линия MRI-H186.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация