CERV-186

Cellinjen CERV-186, som härrör in vitro från xenotransplantation av livmoderhalscancer MRI-H-186, fungerar som en biologisk modell för invasiv, storcellig, icke-keratiniserande skivepitelcancer. Denna cellinje etablerades och anpassades för in vivo-transplantation under ledning av Dr Bodgen vid Mason Research Institute. MRI-H186 kännetecknas av sina genomiska egenskaper och innehåller cirka 26 integrerade kopior av både fullängds- och trunkerade former av HPV16-genomet, vilket avsevärt påverkar dess transkriptomiska profil.

MRI-H186-celler utmärker sig genom sitt robusta uttryck av både fullängds- och trunkerade tidiga HPV16-transkript, och uppvisar särskilt höga nivåer av E5 fullängds-RNA (fl). Denna transkriptionella signatur skiljer sig markant från den som observerats i andra cellinjer för livmoderhalscancer, såsom CaSki och MRI-H196. Dessutom visar den transkriptionella aktiviteten hos MRI-H186, i termer av uttryck av olika andra transkript, en nära anpassning till de mönster som observerats i HPK-IA- och C3-cellinjerna, vilket indikerar ett liknande transkriptionellt beteende i dessa modeller. Förekomsten av både fullängds- och trunkerade genomiska integrationer av HPV16 i MRI-H186-celler är en nyckelfaktor för deras kraftiga uttryck av tidiga virala transkript, vilket särskilt understryks av det betydande uttrycket av E5 fl RNA. Denna intensiva transkriptionsaktivitet kulminerar vid den tidiga polyadenyleringssignalen, vilket belyser den unika transkriptionsdynamiken inom MRI-H186-cellinjen.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring