Preskoči na vsebino
CERV-186
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Dokumenti

CERV-186

Cell line · Številka izdelka 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija CERV-186, pridobljena in vitro iz ksenotransplantacije karcinoma materničnega vratu MRI-H-186, služi kot biološki model za invazivni, velikocelični, nekeratinizirajoči ploščatocelični karcinom. Ta celična linija je bila vzpostavljena in prilagojena za presaditev in vivo pod vodstvom Dr. Bodgena na raziskovalnem inštitutu Mason. Za MRI-H186 je značilno, da vsebuje približno 26 integriranih kopij genoma HPV16 v polni dolžini in skrajšanih oblik, kar pomembno vpliva na njen transkriptomski profil.

Celice MRI-H186 se odlikujejo po močnem izražanju zgodnjih transkriptov HPV16 polne dolžine in skrajšanih transkriptov, zlasti z visoko stopnjo RNK polne dolžine E5 (fl). Ta transkripcijski podpis se pomembno razlikuje od tistega, ki ga opažamo pri drugih celičnih linijah karcinoma materničnega vratu, kot sta CaSki in MRI-H196. Poleg tega se transkripcijska aktivnost MRI-H186 v smislu izražanja različnih drugih transkriptov močno ujema z vzorci, opaženimi v celičnih linijah HPK-IA in C3, kar kaže na podobno transkripcijsko vedenje v teh modelih. Prisotnost genomskih integracij HPV16 v celicah MRI-H186 v polni in skrajšani dolžini je ključni dejavnik za njihovo močno izražanje zgodnjih virusnih transkriptov, kar še posebej poudarja znatno izražanje RNA fl E5. Ta intenzivna transkripcijska aktivnost doseže vrhunec pri zgodnjem signalu poliadenilacije, kar poudarja edinstveno transkripcijsko dinamiko v celični liniji MRI-H186.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
CERV-186 (kataloška številka Cytion 300290)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
HPV-16 pozitiven
Izdelki
Citokeratin 8, 18, vimentin, desmoplakin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2 bo v 7 dneh povzročilo konfluentno monoslojno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
42 let
Etnična pripadnost
Afriški