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- Tissue
- Cuello uterino
- Disease
- Carcinoma de células escamosas
- Synonyms
- Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186
Documents
CERV-186
Cell line · Product number 300290
The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...
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01General information
- Description
La línea celular CERV-186, derivada in vitro del xenotransplante del carcinoma cervical MRI-H-186, sirve como modelo biológico para el carcinoma escamoso invasivo de células grandes no queratinizante. Esta línea celular fue establecida y adaptada para el trasplante in vivo bajo la dirección del Dr. Bodgen en el Instituto de Investigación Mason. Caracterizada por sus propiedades genómicas, la MRI-H186 contiene aproximadamente 26 copias integradas tanto de la forma completa como de la forma truncada del genoma del VPH16, lo que influye significativamente en su perfil transcriptómico.
Las células MRI-H186 se distinguen por su expresión robusta de transcritos tempranos del VPH16, tanto de longitud completa como truncados, y en particular muestran altos niveles de ARN de E5 de longitud completa (fl). Esta firma transcripcional es notablemente distinta de la observada en otras líneas celulares de carcinoma cervical, como CaSki y MRI-H196. Además, la actividad transcripcional de MRI-H186, en términos de la expresión de otros transcritos diversos, muestra una estrecha correspondencia con los patrones observados en las líneas celulares HPK-IA y C3, lo que indica un comportamiento transcripcional similar en todos estos modelos. La presencia tanto de integraciones genómicas completas como truncadas del VPH16 en las células MRI-H186 es un factor clave en su vigorosa expresión de transcritos virales tempranos, lo cual se destaca particularmente por la expresión significativa del ARN E5 de longitud completa. Esta intensa actividad transcripcional culmina en la señal de poliadenilación temprana, lo que resalta la dinámica transcripcional única dentro de la línea celular MRI-H186.
- Tissue
- Cuello uterino
- Disease
- Carcinoma de células escamosas
- Synonyms
- Cerv-186
- MRI-H-186
- MRI-H186
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sí, en ratones desnudos
04Identifiers
- Citation
- CERV-186 (número de catálogo de Cytion 300290)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5720
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Positivo para el VPH-16
- Products
- Citoqueratina 8, 18, vimentina, desmoplaquina
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 2 x 10⁴ células/cm² darán como resultado una monocapa confluente en un plazo de 7 días
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 42 años
- Ethnicity
- Africano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes