CERV-186

子宮頸癌MRI-H-186の異種移植からin vitroで得られたCERV-186細胞株は、浸潤性大細胞非角化性扁平上皮癌の生物学的モデルとして役立っている。この細胞株は、Mason Research InstituteのBodgen博士の指導のもとで樹立され、in vivo移植に適応された。MRI-H186はそのゲノムの特性から、HPV16ゲノムの全長型と切断型の両方が約26コピー統合されており、そのトランスクリプトーム・プロファイルに大きな影響を与えている。

MRI-H186細胞は、HPV16の初期転写産物である全長型および切断型の両方が強固に発現していることで区別され、特にE5全長型（fl）RNAが高レベルで発現している。この転写シグネチャーは、CaSkiやMRI-H196のような他の子宮頸癌細胞株で観察されたものとは明らかに異なっている。さらに、MRI-H186の転写活性は、他の様々な転写産物の発現という点で、HPK-IA細胞株やC3細胞株で観察されたパターンとほぼ一致しており、これらのモデル間で転写挙動が類似していることを示している。MRI-H186細胞には、完全長および切断型HPV16ゲノム統合体の両方が存在することが、初期ウイルス転写産物の旺盛な発現の重要な要因であり、特にE5 fl RNAの顕著な発現によって強調されている。この旺盛な転写活性は初期のポリアデニル化シグナルで頂点に達し、MRI-H186細胞株内でのユニークな転写動態を強調している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。