Gå direkte til indholdet
CERV-186
Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Dokumenter

CERV-186

Cell line · Varenummer 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

CERV-186-cellelinjen, der stammer in vitro fra xenotransplantation af livmoderhalskræft MRI-H-186, fungerer som en biologisk model for invasiv, storcellet, ikke-keratiniserende pladecellekarcinom. Denne cellelinje blev etableret og tilpasset til in vivo-transplantation under ledelse af Dr. Bodgen på Mason Research Institute. MRI-H186 er karakteriseret ved sine genomiske egenskaber og indeholder ca. 26 integrerede kopier af både fuldlængde- og trunkerede former af HPV16-genomet, hvilket har stor indflydelse på dens transkriptomiske profil.

MRI-H186-celler er kendetegnet ved deres robuste udtryk for både fuldlængde og trunkerede tidlige HPV16-transkripter, der især viser høje niveauer af E5 fuldlængde (fl) RNA. Denne transkriptionelle signatur adskiller sig markant fra den, der er observeret i andre cellelinjer fra livmoderhalskræft, såsom CaSki og MRI-H196. Derudover viser den transkriptionelle aktivitet af MRI-H186, hvad angår udtrykket af forskellige andre transkripter, en tæt overensstemmelse med de mønstre, der er observeret i HPK-IA- og C3-cellelinjerne, hvilket indikerer en lignende transkriptionel adfærd på tværs af disse modeller. Tilstedeværelsen af både fuldlængde og trunkerede HPV16 genomiske integrationer i MRI-H186-celler er en nøglefaktor i deres kraftige udtryk af tidlige virale transkripter, hvilket især understreges af det betydelige udtryk af E5 fl RNA. Denne intense transkriptionsaktivitet kulminerer ved det tidlige polyadenyleringssignal, hvilket fremhæver den unikke transkriptionsdynamik inden for MRI-H186-cellelinjen.

Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CERV-186 (Cytion katalognummer 300290)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Udtryk og modtagelighed

Vira
HPV-16 positiv
Produkter
Cytokeratin 8, 18, Vimentin, Desmoplakin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenhængende monolag inden for 7 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
42 år
Etnisk tilhørsforhold
Afrikansk