CERV-186

CERV-186-cellelinjen, som er avledet in vitro fra xenotransplantasjon av livmorhalskarsinom MRI-H-186, fungerer som en biologisk modell for invasiv, storcellet, ikke-keratiniserende plateepitelkarsinom. Denne cellelinjen ble etablert og tilpasset for in vivo-transplantasjon under ledelse av Dr. Bodgen ved Mason Research Institute. MRI-H186 er karakterisert ved sine genomiske egenskaper, og inneholder ca. 26 integrerte kopier av både full lengde og avkortede former av HPV16-genomet, noe som i betydelig grad påvirker dens transkriptomiske profil.

MRI-H186-celler kjennetegnes av et robust uttrykk av både fullstendige og avkortede tidlige HPV16-transkripter, og viser spesielt høye nivåer av E5 full-lengde (fl) RNA. Denne transkripsjonssignaturen skiller seg markant fra den som er observert i andre cellelinjer for livmorhalskreft, som CaSki og MRI-H196. I tillegg viser transkripsjonsaktiviteten til MRI-H186, når det gjelder uttrykket av ulike andre transkripsjoner, et nært samsvar med mønstrene som er observert i HPK-IA- og C3-cellelinjene, noe som indikerer en lignende transkripsjonsatferd på tvers av disse modellene. Tilstedeværelsen av både fullstendige og avkortede HPV16 genomiske integrasjoner i MRI-H186-celler er en nøkkelfaktor i deres kraftige uttrykk av tidlige virale transkripsjoner, noe som særlig understrekes av det betydelige uttrykket av E5 fl RNA. Denne intense transkripsjonsaktiviteten kulminerer ved det tidlige polyadenyleringssignalet, noe som fremhever den unike transkripsjonsdynamikken i MRI-H186-cellelinjen.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring