.jpg)
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Plokščialąstelinė karcinoma
- Sinonimai
- Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186
Dokumentai
CERV-186
Cell line · Prekės numeris 300290
The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- CERV-186Cell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
CERV-186 ląstelių linija, gauta in vitro iš gimdos kaklelio karcinomos MRI-H-186 ksenotransplantato, yra invazinės, stambių ląstelių, nekeratinizuojančios plokščialąstelinės karcinomos biologinis modelis. Ši ląstelių linija buvo sukurta ir pritaikyta in vivo transplantacijai vadovaujant daktarui Bodgenui Masono tyrimų institute. MRI-H186, kuriai būdingos genominės savybės, turi maždaug 26 integruotas tiek pilno ilgio, tiek sutrumpintų ŽPV16 genomo formų kopijas, kurios daro didelę įtaką jos transkriptominiam profiliui.
MRI-H186 ląstelės išsiskiria stipria tiek pilno ilgio, tiek sutrumpintų ankstyvųjų ŽPV16 transkriptų raiška, ypač pasižymi dideliu E5 pilno ilgio (fl) RNR kiekiu. Šis transkripcijos požymis labai skiriasi nuo kitų gimdos kaklelio karcinomos ląstelių linijų, tokių kaip CaSki ir MRI-H196, transkripcijos požymių. Be to, MRI-H186 transkripcinis aktyvumas, išreikštas įvairių kitų transkriptų raiška, labai sutampa su HPK-IA ir C3 ląstelių linijose stebėtais modeliais, o tai rodo, kad transkripcija šiuose modeliuose yra panaši. Tiek pilno ilgio, tiek sutrumpintų ŽPV16 genomo integracijų buvimas MRI-H186 ląstelėse yra pagrindinis veiksnys, lemiantis jų energingą ankstyvųjų viruso transkriptų raišką, kurią ypač pabrėžia didelė E5 fl RNR raiška. Šis intensyvus transkripcijos aktyvumas pasiekia kulminaciją ties ankstyvuoju poliadenilinimo signalu, taip pabrėžiant unikalią transkripcijos dinamiką MRI-H186 ląstelių linijoje.
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Plokščialąstelinė karcinoma
- Sinonimai
- Cerv-186
- MRI-H-186
- MRI-H186
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 2
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Taip, su nuogomis pelėmis
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- CERV-186 (Cytion katalogo numeris 300290)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5720
05Išraiška ir jautrumas
- Virusai
- ŽPV-16 teigiamas
- Produktai
- Citokeratinas 8, 18, vimentinas, desmoplakinas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 2 x 104 ląstelės/cm2 per 7 dienas suformuos susiliejusią monosluoksnę.
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 42 metai
- Etninė priklausomybė
- Afrikos
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip