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- Tecido
- Colo do útero
- Doença
- Carcinoma de células escamosas
- Sinónimos
- Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186
Documentos
CERV-186
Cell line · Número do produto 300290
The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...
Personalização / Recomendações
- CERV-186Cell line€800.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha de células CERV-186, derivada in vitro do xenotransplante de carcinoma cervical MRI-H-186, serve de modelo biológico para o carcinoma de células escamosas invasivo, de grandes células e não queratinizante. Esta linha celular foi estabelecida e adaptada para transplante in vivo sob a direção do Dr. Bodgen no Mason Research Institute. Caracterizada pelas suas propriedades genómicas, a MRI-H186 contém aproximadamente 26 cópias integradas de formas completas e truncadas do genoma do HPV16, que influenciam significativamente o seu perfil transcriptómico.
As células MRI-H186 distinguem-se pela sua expressão robusta de transcrições iniciais do HPV16, tanto completas como truncadas, apresentando nomeadamente níveis elevados de ARN E5 completo (fl). Esta assinatura transcricional é notavelmente distinta da observada noutras linhas celulares de carcinoma cervical, como CaSki e MRI-H196. Além disso, a atividade transcricional da MRI-H186, em termos da expressão de vários outros transcritos, apresenta um alinhamento próximo com os padrões observados nas linhas celulares HPK-IA e C3, indicando um comportamento transcricional semelhante nestes modelos. A presença de integrações genómicas de HPV16, tanto completas como truncadas, nas células MRI-H186 é um fator-chave na sua expressão vigorosa de transcritos virais iniciais, particularmente sublinhada pela expressão significativa de RNA fl E5. Esta intensa atividade transcricional culmina no sinal de poliadenilação precoce, realçando a dinâmica transcricional única na linha celular MRI-H186.
- Tecido
- Colo do útero
- Doença
- Carcinoma de células escamosas
- Sinónimos
- Cerv-186
- MRI-H-186
- MRI-H186
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 2
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, em ratinhos nus
04Identificadores
- Referência
- CERV-186 (número de catálogo Cytion 300290)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5720
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- HPV-16 positivo
- Produtos
- Citoqueratina 8, 18, Vimentina, Desmoplaquina
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 2 x 104 células/cm² resultarão numa monocamada confluente em 7 dias
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 42 anos
- Etnia
- Africano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim