CERV-186

La linea cellulare CERV-186, derivata in vitro dallo xenotrapianto del carcinoma cervicale MRI-H-186, serve come modello biologico per il carcinoma squamoso invasivo a grandi cellule non cheratinizzante. Questa linea cellulare è stata creata e adattata per il trapianto in vivo sotto la direzione del Dr. Bodgen presso il Mason Research Institute. Caratterizzata da proprietà genomiche, la MRI-H186 contiene circa 26 copie integrate di forme complete e tronche del genoma di HPV16, che influenzano significativamente il suo profilo trascrittomico.

Le cellule MRI-H186 si distinguono per la robusta espressione di trascritti precoci di HPV16 sia completi che troncati, in particolare mostrano alti livelli di RNA E5 completo (fl). Questa firma trascrizionale è notevolmente diversa da quella osservata in altre linee cellulari di carcinoma cervicale come CaSki e MRI-H196. Inoltre, l'attività trascrizionale di MRI-H186, in termini di espressione di vari altri trascritti, mostra uno stretto allineamento con i modelli osservati nelle linee cellulari HPK-IA e C3, indicando un comportamento trascrizionale simile in questi modelli. La presenza di integrazioni genomiche di HPV16 sia complete che tronche nelle cellule MRI-H186 è un fattore chiave nella loro vigorosa espressione dei primi trascritti virali, sottolineata in particolare dalla significativa espressione dell'RNA E5 fl. Questa intensa attività trascrizionale culmina in corrispondenza del segnale di poliadenilazione precoce, evidenziando le dinamiche trascrizionali uniche della linea cellulare MRI-H186.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia