CERV-186

CERV-186-solulinja, joka on johdettu in vitro kohdunkaulan karsinooman MRI-H-186 ksenotransplantaatiosta, toimii biologisena mallina invasiiviselle, suurisoluiselle, ei-keratinisoivalle okasolusyövälle. Tämä solulinja perustettiin ja mukautettiin in vivo -siirtoa varten tohtori Bodgenin johdolla Mason Research Institutessa. MRI-H186 sisältää noin 26 integroitunutta kopiota HPV16-genomin täyspitkästä ja typistetystä muodosta, jotka vaikuttavat merkittävästi sen transkriptomiseen profiiliin.

MRI-H186-solut eroavat toisistaan siten, että ne ilmentävät voimakkaasti sekä täyspitkiä että typistettyjä varhaisia HPV16-transkriptejä, ja niissä on erityisesti runsaasti E5:n täyspitkää (fl) RNA:ta. Tämä transkriptionaalinen piirre eroaa huomattavasti muista kohdunkaulan karsinooman solulinjoista, kuten CaSki- ja MRI-H196-solulinjoista. Lisäksi MRI-H186:n transkriptionaalinen aktiivisuus useiden muiden transkriptien ilmentymisen osalta on hyvin samansuuntainen HPK-IA- ja C3-solulinjoissa havaittujen mallien kanssa, mikä viittaa samanlaiseen transkriptionaaliseen käyttäytymiseen näissä malleissa. Sekä täyspitkien että typistettyjen HPV16-genomi-integraatioiden esiintyminen MRI-H186-soluissa on keskeinen tekijä niiden varhaisen viruksen transkriptien voimakkaassa ilmentymisessä, mitä korostaa erityisesti E5 fl RNA:n merkittävä ilmentyminen. Tämä voimakas transkriptioaktiivisuus huipentuu varhaiseen polyadenylaatiosignaaliin, mikä korostaa ainutlaatuista transkriptiodynamiikkaa MRI-H186-solulinjassa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa