.jpg)
- الأنسجة
- عنق الرحم
- المرض
- سرطان الخلايا الحرشفية
- المرادفات
- Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186
المستندات
CERV-186
Cell line · رقم المنتج 300290
The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...
التخصيص / التوصيات
- CERV-186Cell line€800.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
يُستخدم خط الخلايا CERV-186، المشتق في المختبر من عملية زرع الخلايا السرطانية لسرطان عنق الرحم MRI-H-186، كنموذج بيولوجي لسرطان الخلايا الحرشفية الغازية ذات الخلايا الكبيرة غير المتقرن. وقد تم إنشاء هذا الخط الخلوي وتكييفه للزرع في الجسم الحي تحت إشراف الدكتور بودجن في معهد ماسون للأبحاث. يحتوي MRI-H186 الذي يتميز بخصائصه الجينومية، على ما يقرب من 26 نسخة متكاملة من كل من الأشكال الكاملة والمبتورة من جينوم فيروس الورم الحليمي البشري 16، والتي تؤثر بشكل كبير على ملفه النسخي.
وتتميز خلايا MRI-H186 بتعبيرها القوي عن كل من نسخ فيروس الورم الحليمي البشري 16 المبكرة كاملة الطول والمبتورة على حد سواء، حيث تظهر بشكل خاص مستويات عالية من الحمض النووي الريبي الكامل E5. ويختلف هذا التوقيع النسخي بشكل ملحوظ عن ذلك الذي لوحظ في سلالات خلايا سرطان عنق الرحم الأخرى مثل CaSki وMRI-H196. بالإضافة إلى ذلك، يُظهر نشاط النسخ في MRI-H186، من حيث التعبير عن مختلف النسخ الأخرى، توافقًا وثيقًا مع الأنماط التي لوحظت في خطوط خلايا HPK-IA و C3، مما يشير إلى سلوك نسخ مماثل عبر هذه النماذج. إن وجود كل من التكامل الجينومي الكامل والمبتور لفيروس الورم الحليمي البشري 16 في خلايا MRI-H186 هو عامل رئيسي في تعبيرها القوي عن النسخ الفيروسي المبكر، وهو ما يؤكده بشكل خاص التعبير الكبير للحمض النووي الريبي E5 fl RNA. يبلغ هذا النشاط النسخي المكثف ذروته عند إشارة بوليادينيلليشن المبكرة، مما يسلط الضوء على ديناميكيات النسخ الفريدة داخل خط خلايا MRI-H186.
- الأنسجة
- عنق الرحم
- المرض
- سرطان الخلايا الحرشفية
- المرادفات
- Cerv-186
- MRI-H-186
- MRI-H186
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- أنثى
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 2
03الخصائص
- المورفولوجيا
- شبيه بالظهارة
- مُسبِّب للأورام
- نعم، في الفئران العارية
04المعرّفات
- المرجع
- CERV-186 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300290)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_5720
05التعبير والقابلية للإصابة
- الفيروسات
- فيروس الورم الحليمي البشري 16 إيجابي
- المنتجات
- سيتوكيراتين 8، 18، فيمنتين، ديسموبلاكين
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- كثافة البذر
- 2 × 104 خلية/سم² ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 7 أيام
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- 42 سنة
- الأصل العرقي
- أفريقي
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم