Перейти до вмісту
CERV-186
Тканина
Шийка матки
Хвороба
Плоскоклітинний рак
Синоніми
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Документи

CERV-186

Cell line · Номер товару 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія CERV-186, отримана in vitro з ксенотрансплантата карциноми шийки матки MRI-H-186, слугує біологічною моделлю інвазивної, великоклітинної, неороговілої плоскоклітинної карциноми. Ця клітинна лінія була створена та адаптована для трансплантації in vivo під керівництвом доктора Бодгена в Науково-дослідному інституті Мейсона. За своїми геномними властивостями MRI-H186 містить приблизно 26 інтегрованих копій як повної, так і усіченої форми геному ВПЛ16, які суттєво впливають на її транскриптомний профіль.

Клітини MRI-H186 відрізняються сильною експресією як повнорозмірних, так і усічених ранніх транскриптів ВПЛ16, особливо високим рівнем повнорозмірної (fl) РНК E5. Цей транскрипційний підпис помітно відрізняється від того, що спостерігається в інших клітинних лініях карциноми шийки матки, таких як CaSki і MRI-H196. Крім того, транскрипційна активність MRI-H186, з точки зору експресії різних інших транскриптів, тісно пов'язана з моделями, що спостерігаються в клітинних лініях HPK-IA і C3, що вказує на подібну транскрипційну поведінку в цих моделях. Наявність як повнорозмірних, так і усічених геномних інтеграцій ВПЛ16 в клітинах MRI-H186 є ключовим фактором активної експресії ними ранніх вірусних транскриптів, що особливо підкреслюється значною експресією E5 fl РНК. Ця інтенсивна транскрипційна активність досягає кульмінації при ранньому сигналі поліаденілювання, підкреслюючи унікальну транскрипційну динаміку в клітинній лінії MRI-H186.

Тканина
Шийка матки
Хвороба
Плоскоклітинний рак
Синоніми
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
2

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
CERV-186 (номер за каталогом Cytion 300290)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_5720

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
ВПЛ-16 позитивний
Продукція
Цитокератин 8, 18, Віментин, Десмоплакін

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2 x 104 клітин/см2 призведе до утворення конфлюентного моношару протягом 7 днів
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
42 роки
Етнічна приналежність
Африканський