Langsung ke isi
CERV-186
Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa
Sinonim
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

CERV-186

Cell line · Nomor produk 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel CERV-186, yang diturunkan secara in vitro dari xenotransplantasi karsinoma serviks MRI-H-186, berfungsi sebagai model biologis untuk karsinoma sel skuamosa invasif, sel besar, dan tidak berkeratin. Garis sel ini dibuat dan diadaptasi untuk transplantasi in vivo di bawah arahan Dr. Bodgen di Mason Research Institute. Dicirikan oleh sifat genomnya, MRI-H186 mengandung sekitar 26 salinan terintegrasi dari bentuk genom HPV16 yang lengkap dan terpotong, yang secara signifikan memengaruhi profil transkriptomiknya.

Sel MRI-H186 dibedakan berdasarkan ekspresi kuat dari transkrip HPV16 awal yang panjang dan terpotong, terutama yang menunjukkan tingkat tinggi E5 full-length (fl) RNA. Tanda transkripsi ini sangat berbeda dari yang diamati pada garis sel karsinoma serviks lainnya seperti CaSki dan MRI-H196. Selain itu, aktivitas transkripsi MRI-H186, dalam hal ekspresi berbagai transkrip lainnya, menunjukkan keselarasan yang erat dengan pola yang diamati pada garis sel HPK-IA dan C3, yang menunjukkan perilaku transkrip yang serupa di seluruh model ini. Kehadiran integrasi genomik HPV16 yang panjang penuh dan terpotong dalam sel MRI-H186 merupakan faktor kunci dalam ekspresi kuat transkrip virus awal, terutama digarisbawahi oleh ekspresi signifikan E5 fl RNA. Aktivitas transkripsi yang intens ini memuncak pada sinyal poliadenilasi awal, menyoroti dinamika transkripsi yang unik dalam garis sel MRI-H186.

Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa
Sinonim
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang

04Pengidentifikasi

Referensi
CERV-186 (Nomor katalog Cytion 300290)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Ekspresi dan kerentanan

Virus
HPV-16 positif
Produk
Sitokeratin 8, 18, Vimentin, Desmoplakin

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
2 x 10⁴ sel/cm² akan menghasilkan lapisan tunggal yang padat dalam waktu 7 hari.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
42 tahun
Etnis
Afrika