Tartalomra ugrás
CERV-186
Szövet
Cervix
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Dokumentumok

CERV-186

Cell line · Termékszám 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A CERV-186 sejtvonal, amely in vitro az MRI-H-186 méhnyakrák xenotranszplantációjából származik, az invazív, nagysejtű, nem keratinizáló laphámsejtes karcinóma biológiai modelljeként szolgál. Ezt a sejtvonalat a Mason Kutatóintézetben Dr. Bodgen vezetésével hozták létre és adaptálták in vivo transzplantációra. A genomikai tulajdonságai alapján jellemezhető MRI-H186 a HPV16 genom teljes hosszúságú és csonka formáinak mintegy 26 integrált példányát tartalmazza, amelyek jelentősen befolyásolják a transzkriptomikai profilját.

Az MRI-H186 sejteket megkülönbözteti a teljes hosszúságú és a csonka korai HPV16 transzkriptumok erőteljes expressziója, különösen az E5 teljes hosszúságú (fl) RNS magas szintje. Ez a transzkripciós szignatúra jelentősen különbözik más méhnyakrákos sejtvonalakban, például a CaSki és az MRI-H196 esetében megfigyeltektől. Ezenkívül az MRI-H186 transzkripciós aktivitása a különböző egyéb transzkriptumok expressziója tekintetében szoros egyezést mutat a HPK-IA és C3 sejtvonalakban megfigyelt mintázatokkal, ami hasonló transzkripciós viselkedést jelez ezekben a modellekben. A teljes hosszúságú és csonka HPV16 genomiális integrációk jelenléte az MRI-H186 sejtekben kulcsfontosságú tényező a korai vírusátírások erőteljes expressziójában, amit különösen az E5 fl RNS jelentős expressziója támaszt alá. Ez az intenzív transzkripciós aktivitás a korai poliadenilációs jelnél tetőzik, kiemelve az MRI-H186 sejtvonalon belüli egyedi transzkripciós dinamikát.

Szövet
Cervix
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
CERV-186 (Cytion katalógusszám: 300290)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
HPV-16 pozitív
Termékek
Cytokeratin 8, 18, Vimentin, Desmoplakin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2 7 napon belül konfluens monoréteget eredményez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
42 év
Etnikai hovatartozás
Afrikai