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CERV-186
Tissue
子宫颈
Disease
鳞状细胞癌
Synonyms
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

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CERV-186

Cell line · Product number 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

CERV-186 细胞系由宫颈癌 MRI-H-186 的异种移植体外培养而成，是侵袭性、大细胞、非角化鳞状细胞癌的生物学模型。该细胞系是在梅森研究所博德根博士的指导下建立和改造的，用于体内移植。MRI-H186 具有基因组特性，含有约 26 个 HPV16 基因组全长和截短形式的整合拷贝，对其转录组特征有显著影响。

MRI-H186细胞的显著特征是全长和截短的早期HPV16转录本的强表达，尤其是E5全长（fl）RNA的高水平表达。这种转录特征与在 CaSki 和 MRI-H196 等其他宫颈癌细胞系中观察到的特征明显不同。此外，MRI-H186 的转录活性（各种其他转录本的表达）与 HPK-IA 和 C3 细胞系中观察到的模式非常接近，表明这些模型中存在类似的转录行为。MRI-H186细胞中存在全长和截短的HPV16基因组整合是其早期病毒转录本表达活跃的关键因素，E5 fl RNA的大量表达尤其突出了这一点。这种强烈的转录活动在早期多聚腺苷酸化信号处达到顶峰，突显了 MRI-H186 细胞系内独特的转录动态。

Tissue
子宫颈
Disease
鳞状细胞癌
Synonyms
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
上皮样
Tumourigenic
是，在裸鼠身上

04Identifiers

Citation
CERV-186（Cytion 目录号 300290）
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05Expression and susceptibility

Viruses
HPV-16 阳性
Products
细胞角蛋白 8、18、波形蛋白、去瘤蛋白

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
2×10⁴个细胞/平方厘米将在7天内形成融合的单层细胞。
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
42 年
Ethnicity
非洲