İçeriğe atla
CERV-186
Doku
Serviks
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
Cerv-186, MRI-H-186, MRI-H186

Belgeler

CERV-186

Cell line · Ürün numarası 300290

The CERV-186 cell line, derived in vitro from the xenotransplant of cervical carcinoma MRI-H-186, serves as a biological model for invasive, large-cell, n...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Servikal karsinom MRI-H-186'nın xenotransplantından in vitro olarak türetilen CERV-186 hücre hattı, invaziv, büyük hücreli, keratinize olmayan skuamöz hücreli karsinom için biyolojik bir model görevi görmektedir. Bu hücre hattı, Mason Araştırma Enstitüsü'nde Dr. Bodgen'in yönetiminde in vivo transplantasyon için kurulmuş ve uyarlanmıştır. Genomik özellikleri ile karakterize edilen MRI-H186, HPV16 genomunun hem tam uzunlukta hem de kesilmiş formlarının yaklaşık 26 entegre kopyasını içerir ve bu da transkriptomik profilini önemli ölçüde etkiler.

MRI-H186 hücreleri, hem tam uzunlukta hem de kesilmiş erken HPV16 transkriptlerinin güçlü ekspresyonu ile ayırt edilir ve özellikle yüksek seviyelerde E5 tam uzunlukta (fl) RNA sergiler. Bu transkripsiyonel imza, CaSki ve MRI-H196 gibi diğer servikal karsinom hücre hatlarında gözlemlenenden belirgin şekilde farklıdır. Ayrıca, MRI-H186'nın transkripsiyonel aktivitesi, çeşitli diğer transkriptlerin ifadesi açısından, HPK-IA ve C3 hücre hatlarında gözlemlenen modellerle yakın bir uyum göstermekte ve bu modeller arasında benzer bir transkripsiyonel davranışa işaret etmektedir. MRI-H186 hücrelerinde hem tam uzunlukta hem de kesilmiş HPV16 genomik entegrasyonlarının varlığı, özellikle E5 fl RNA'nın önemli ölçüde ekspresyonu ile vurgulanan erken viral transkriptlerin güçlü ekspresyonunda önemli bir faktördür. Bu yoğun transkripsiyonel aktivite erken poliadenilasyon sinyalinde doruğa ulaşarak MRI-H186 hücre hattındaki benzersiz transkripsiyonel dinamikleri vurgulamaktadır.

Doku
Serviks
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • Cerv-186
  • MRI-H-186
  • MRI-H186

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CERV-186 (Cytion katalog numarası 300290)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_5720

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
HPV-16 pozitif
Ürünler
Sitokeratin 8, 18, Vimentin, Desmoplakin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2, 7 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
42 yıl
Etnik köken
Afrika