Meth A sarcoma

Les cellules de sarcome Meth A, issues d’une tumeur induite chimiquement chez des souris Balb/c, constituent un modèle essentiel pour comprendre la biologie tumorale et les mécanismes moléculaires à l’origine du développement du sarcome. Un aspect clé de la recherche sur les cellules de sarcome Meth A porte sur l’étude de la protéine p53, associée à la transformation cellulaire et connue pour son rôle dans la suppression tumorale. Habituellement, la protéine p53 est très labile, mais sa stabilité est nettement accrue dans de nombreuses lignées cellulaires de fibrosarcomes dérivées de tumeurs induites par des agents physiques ou chimiques. Cette stabilisation est souvent associée à la formation d’un complexe stable avec la protéine de choc thermique apparentée hsc70.

Il est intéressant de noter que les cellules de sarcome Meth A présentent un comportement unique en ce qui concerne la stabilité de la protéine p53. Bien que la protéine p53 soit très stable dans ces cellules, aucune interaction détectable avec la protéine hsc70 n’est observée. Cela suggère que l’incapacité à former un tel complexe est probablement due à la structure primaire de la protéine p53 endogène. Lorsque d’autres variants de p53 sont introduits dans les cellules de sarcome Meth A, un complexe p53-hsc70 se forme, ce qui indique que la structure primaire de p53 est un déterminant essentiel de son interaction avec hsc70 et, par conséquent, de sa stabilité.

Des recherches plus approfondies menées à l’aide d’expériences de transfection stable ont révélé que différentes variantes de p53 sont dégradées à des vitesses distinctes dans divers types de cellules transformées, ce qui souligne le rôle de la structure primaire de p53 dans la détermination de son taux de renouvellement. De plus, l’environnement cellulaire influe également sur la stabilité de p53, comme en témoignent les taux de dégradation différents d’au moins une variante de p53 dans les cellules BALB/c-3T3 non transformées par rapport aux cellules de fibrosarcome transformées. Cela met en évidence l’interaction complexe entre les facteurs génétiques et le contexte cellulaire dans la régulation de la stabilité et de la fonction de p53 dans les cellules de sarcome Meth A.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.