Meth A sarcoma

Balb/c-hiirten kemiallisesti indusoidusta kasvaimesta peräisin olevat Meth A -sarkoomasolut ovat tärkeä malli kasvainten biologian ja sarkooman kehittymistä ohjaavien molekyylimekanismien ymmärtämiseksi. Meth A -sarkoomasolujen tutkimuksessa keskeistä on tutkia transformaatioon liittyvää proteiinia p53, joka tunnetaan roolistaan kasvainten tukahduttamisessa. Tyypillisesti p53 on erittäin labiili, mutta sen stabiilisuus on selvästi lisääntynyt monissa fibrosarkoomasolulinjoissa, jotka ovat peräisin fysikaalisten tai kemiallisten aineiden aiheuttamista kasvaimista. Tämä stabiloituminen korreloi usein stabiilin kompleksin muodostumisen kanssa lämpösokkiproteiini hsc70:n kanssa.

Mielenkiintoista on, että Meth A -sarkoomasolut käyttäytyvät ainutlaatuisesti p53:n vakauden suhteen. Vaikka p53 on näissä soluissa hyvin stabiili, vuorovaikutusta hsc70:n kanssa ei ole havaittavissa. Tämä viittaa siihen, että kyvyttömyys muodostaa tällaista kompleksia johtuu todennäköisesti endogeenisen p53:n primaarirakenteesta. Kun Meth A -sarkoomasoluihin siirretään muita p53:n variantteja, p53-hsc70-kompleksi muodostuu, mikä osoittaa, että p53:n primaarirakenne on ratkaiseva tekijä sen vuorovaikutuksessa hsc70:n kanssa ja näin ollen sen vakaudessa.

Jatkotutkimukset, joissa käytettiin vakaita transfektiokokeita, ovat paljastaneet, että eri p53-variantit hajoavat eri nopeudella eri transformoiduissa solutyypeissä, mikä korostaa p53:n primaarirakenteen merkitystä sen vaihtumisnopeuden määrittämisessä. Lisäksi soluympäristö vaikuttaa myös p53:n vakauteen, kuten ainakin yhden p53-variantin erilainen hajoamisnopeus ei-transformoituneissa BALB/c-3T3-soluissa verrattuna transformoituneisiin fibrosarkoomasoluihin osoittaa. Tämä korostaa geneettisten tekijöiden ja solukontekstin monimutkaista vuorovaikutusta p53:n stabiilisuuden ja toiminnan säätelyssä Meth A -sarkoomasoluissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa