Gå direkt till innehållet
Meth A sarcoma
Vävnad
Hud
Sjukdom
Fibrosarkom
Synonymer
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Meth A sarcoma

Cell line · Produktnummer 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Meth A-sarkomceller, som härrör från en kemiskt inducerad tumör hos Balb/c-möss, utgör en viktig modell för att förstå tumörbiologi och de molekylära mekanismer som driver sarkomutvecklingen. En viktig aspekt av forskningen kring Meth A-sarkomcellerna är studierna av det transformationsrelaterade proteinet p53, som är känt för sin roll i tumörbekämpningen. Normalt sett är p53 mycket labilt, men dess stabilitet ökar markant i många fibrosarkomcellinjer som härrör från tumörer som inducerats av fysiska eller kemiska ämnen. Denna stabilisering korrelerar ofta med bildandet av ett stabilt komplex med värmechockproteinet hsc70.

Intressant nog uppvisar Meth A-sarkomceller ett unikt beteende när det gäller p53-stabilitet. Trots att p53 är mycket stabilt i dessa celler finns det ingen påvisbar interaktion med hsc70. Detta tyder på att oförmågan att bilda ett sådant komplex sannolikt beror på den primära strukturen hos den endogena p53. När andra p53-varianter introduceras i Meth A-sarkomceller bildas ett p53-hsc70-komplex, vilket tyder på att den primära strukturen hos p53 är en avgörande faktor för dess interaktion med hsc70 och följaktligen dess stabilitet.

Ytterligare undersökningar med hjälp av stabila transfektionsexperiment har visat att olika p53-varianter bryts ned i olika takt i olika transformerade celltyper, vilket understryker den roll som p53:s primära struktur spelar för att bestämma dess omsättningshastighet. Dessutom påverkar den cellulära miljön också p53-stabiliteten, vilket framgår av olika nedbrytningshastigheter för minst en p53-variant i icke-transformerade BALB/c-3T3-celler jämfört med transformerade fibrosarkomceller. Detta belyser det komplexa samspelet mellan genetiska faktorer och cellulära sammanhang när det gäller att reglera p53-stabilitet och funktion i Meth A-sarkomceller.

Vävnad
Hud
Sjukdom
Fibrosarkom
Synonymer
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runda celler
Tumörframkallande
Ja
Fördubblingstid
28 till 30 timmar

04Identifierare

Källa
Meth A-sarkom (Cytion katalognummer 400284)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Vidareodling
Låt cellaggregaten sedimentera till botten av kolven, kasta bort det översta mediet, sprid cellerna genom försiktig pipettering och häll över dem i nya kolvar. Resuspendera cellsuspensionen i kolven och ta en representativ alikvot för att räkna antalet celler per ml. Späd cellsuspensionen till 1x105 celler/ml med färskt medium och överför den till nya kolvar.
Såtäthet
Starta nya odlingar med 2 till 3 x 106 celler/ml. När cellerna har återhämtat sig från frys- och upptiningsprocessen efter 1 till 2 passager, justera celltätheten till 1 x 106 celler/ml när cellerna delas.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Cirka 53% av det ursprungliga cellantalet samlades in efter frysning.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
BALB/c
Donatorns ålder
Vuxen