Preskoči na vsebino
Meth A sarcoma
Tkivo
Koža
Bolezen
Fibrosarkom
Sinonimi
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumenti

Meth A sarcoma

Cell line · Številka izdelka 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice sarkoma Meth A, ki izvirajo iz kemično povzročenega tumorja pri miših Balb/c, so ključni model za razumevanje biologije tumorjev in molekularnih mehanizmov, ki spodbujajo razvoj sarkomov. Ključni vidik raziskav sarkomskih celic Meth A vključuje preučevanje beljakovine p53, povezane s transformacijo, ki je znana po svoji vlogi pri zatiranju tumorjev. Običajno je p53 zelo labilen, vendar se njegova stabilnost izrazito poveča v številnih fibrosarkomskih celičnih linijah, ki izhajajo iz tumorjev, povzročenih s fizikalnimi ali kemičnimi dejavniki. Ta stabilizacija je pogosto povezana z oblikovanjem stabilnega kompleksa s sorodnim proteinom toplotnega šoka hsc70.

Zanimivo je, da imajo sarkomske celice Meth A edinstveno vedenje glede stabilnosti p53. Čeprav je p53 v teh celicah zelo stabilen, ni zaznati interakcije s hsc70. To nakazuje, da je nezmožnost tvorbe takšnega kompleksa verjetno posledica primarne strukture endogenega p53. Ko v celice sarkoma Meth A vnesemo druge različice p53, se kompleks p53-hsc70 oblikuje, kar kaže na to, da je primarna struktura p53 odločilna za njegovo interakcijo s hsc70 in posledično za njegovo stabilnost.

Nadaljnje raziskave s poskusi stabilne transfekcije so razkrile, da se različne različice p53 razgrajujejo z različno hitrostjo v različnih vrstah transformiranih celic, kar poudarja vlogo primarne strukture p53 pri določanju hitrosti njegovega obnavljanja. Poleg tega na stabilnost p53 vpliva tudi celično okolje, kar dokazujejo različne stopnje razgradnje vsaj ene različice p53 v netransformiranih celicah BALB/c-3T3 v primerjavi s transformiranimi celicami fibrosarkoma. To kaže na zapleteno medsebojno vplivanje genetskih dejavnikov in celičnega okolja pri uravnavanju stabilnosti in delovanja p53 v sarkomskih celicah Meth A.

Tkivo
Koža
Bolezen
Fibrosarkom
Sinonimi
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Tumorigeničen
Da
Čas podvojitve
28 do 30 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Sarkom Meth A (kataloška številka Cytion 400284)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Pustite, da se agregati celic usedejo na dno kolbe, zavrzite supernatantno gojišče, razpršite celice z nežnim pipetiranjem in jih razdelite v nove kolbe. Ponovno suspendirajte suspenzijo celic v kolbi in odvzemite reprezentativni alikvot za štetje števila celic na ml. Razredčite suspenzijo celic na 1x105 celic/ml s svežim gojiščem in jo prenesite v nove kolbe.
Gostota setve
Začnite nove kulture z 2 do 3 x 106 celicami/ml. Ko se celice po 1 do 2 prehodih opomorejo od zamrzovanja in odmrzovanja, pri delitvi celic prilagodite gostoto celic na 1 x 106 celic/ml.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po zamrznitvi je bilo zbranih približno 53 % začetnega števila celic.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
Odrasli