Meth A sarcoma

As células do sarcoma Meth A, originárias de um tumor induzido quimicamente em camundongos Balb/c, constituem um modelo crucial para a compreensão da biologia tumoral e dos mecanismos moleculares que impulsionam o desenvolvimento do sarcoma. Um aspecto fundamental da pesquisa com células do sarcoma Meth A envolve o estudo da proteína p53, relacionada à transformação celular, conhecida por seu papel na supressão tumoral. Normalmente, a p53 é altamente lábil, mas sua estabilidade aumenta significativamente em muitas linhagens celulares de fibrossarcoma derivadas de tumores induzidos por agentes físicos ou químicos. Essa estabilização costuma estar correlacionada com a formação de um complexo estável com a proteína de choque térmico cognata hsc70.

Curiosamente, as células do sarcoma Meth A exibem um comportamento único no que diz respeito à estabilidade da p53. Apesar de a p53 ser muito estável nessas células, não há interação detectável com a hsc70. Isso sugere que a incapacidade de formar tal complexo provavelmente se deve à estrutura primária da p53 endógena. Quando outras variantes da p53 são introduzidas nas células do sarcoma Meth A, um complexo p53-hsc70 se forma, indicando que a estrutura primária da p53 é um determinante crítico de sua interação com a hsc70 e, consequentemente, de sua estabilidade.

Investigações adicionais, utilizando experimentos de transfecção estável, revelaram que diferentes variantes do p53 são degradadas em taxas distintas em vários tipos de células transformadas, enfatizando o papel da estrutura primária do p53 na determinação de sua taxa de renovação. Além disso, o ambiente celular também influencia a estabilidade do p53, conforme evidenciado pelas diferentes taxas de degradação de pelo menos uma variante do p53 em células BALB/c-3T3 não transformadas, em comparação com células de fibrossarcoma transformadas. Isso destaca a complexa interação entre fatores genéticos e o contexto celular na regulação da estabilidade e da função do p53 em células de sarcoma Meth A.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.