Μετάβαση στο περιεχόμενο
Meth A sarcoma
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοσάρκωμα
Συνώνυμα
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Έγγραφα

Meth A sarcoma

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα σαρκώματος Meth A, που προέρχονται από χημικά επαγόμενο όγκο σε ποντίκια Balb/c, αποτελούν ένα κρίσιμο μοντέλο για την κατανόηση της βιολογίας του όγκου και των μοριακών μηχανισμών που οδηγούν στην ανάπτυξη του σαρκώματος. Μια βασική πτυχή της έρευνας των κυττάρων σαρκώματος Meth A περιλαμβάνει τη μελέτη της πρωτεΐνης p53, που σχετίζεται με τον μετασχηματισμό και είναι γνωστή για τον ρόλο της στην καταστολή των όγκων. Τυπικά, η p53 είναι εξαιρετικά ευμετάβλητη, αλλά η σταθερότητά της αυξάνεται σημαντικά σε πολλές κυτταρικές σειρές ινοσαρκώματος που προέρχονται από όγκους που προκαλούνται από φυσικούς ή χημικούς παράγοντες. Αυτή η σταθεροποίηση συσχετίζεται συχνά με το σχηματισμό σταθερού συμπλόκου με τη συγγενή πρωτεΐνη θερμικού σοκ hsc70.

Είναι ενδιαφέρον ότι τα κύτταρα σαρκώματος Meth A παρουσιάζουν μοναδική συμπεριφορά όσον αφορά τη σταθερότητα του p53. Παρά το γεγονός ότι η p53 είναι πολύ σταθερή σε αυτά τα κύτταρα, δεν υπάρχει ανιχνεύσιμη αλληλεπίδραση με την hsc70. Αυτό υποδηλώνει ότι η αδυναμία σχηματισμού ενός τέτοιου συμπλόκου οφείλεται πιθανότατα στην πρωτογενή δομή της ενδογενούς p53. Όταν άλλες παραλλαγές του p53 εισάγονται σε κύτταρα σαρκώματος Meth A, σχηματίζεται σύμπλοκο p53-hsc70, υποδεικνύοντας ότι η πρωτογενής δομή του p53 είναι κρίσιμος καθοριστικός παράγοντας της αλληλεπίδρασής του με το hsc70 και, κατά συνέπεια, της σταθερότητάς του.

Περαιτέρω έρευνες με τη χρήση πειραμάτων σταθερής διαμόλυνσης αποκάλυψαν ότι οι διάφορες παραλλαγές p53 αποικοδομούνται με διαφορετικούς ρυθμούς σε διάφορους μετασχηματισμένους τύπους κυττάρων, τονίζοντας τον ρόλο της πρωτογενούς δομής της p53 στον καθορισμό του ρυθμού εναλλαγής της. Επιπλέον, το κυτταρικό περιβάλλον επηρεάζει επίσης τη σταθερότητα του p53, όπως αποδεικνύεται από τους διαφορετικούς ρυθμούς αποικοδόμησης τουλάχιστον μιας παραλλαγής του p53 σε μη μετασχηματισμένα κύτταρα BALB/c-3T3 σε σύγκριση με μετασχηματισμένα κύτταρα ινοσαρκώματος. Αυτό αναδεικνύει την πολύπλοκη αλληλεπίδραση μεταξύ γενετικών παραγόντων και κυτταρικού περιβάλλοντος στη ρύθμιση της σταθερότητας και της λειτουργίας του p53 σε κύτταρα σαρκώματος Meth A.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοσάρκωμα
Συνώνυμα
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Στρογγυλά κύτταρα
Ογκογόνος
Ναι
Χρόνος διπλασιασμού
28 έως 30 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Σάρκωμα Meth A (αριθμός καταλόγου Cytion 400284)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_5798

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφήστε τα συσσωματώματα κυττάρων να κατακαθίσουν στον πυθμένα της φιάλης, απορρίψτε το υπερκείμενο μέσο, διασκορπίστε τα κύτταρα με απαλό πιπέττημα και μεταφέρετε τα σε νέες φιάλες. Ανακατέψτε ξανά το κυτταρικό εναιώρημα στη φιάλη και πάρτε ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα για να μετρήσετε τον αριθμό των κυττάρων ανά ml. Αραιώστε το κυτταρικό εναιώρημα σε 1x105 κύτταρα/ml με φρέσκο μέσο και μεταφέρετε το σε νέες φιάλες.
Πυκνότητα σποράς
Ξεκινήστε νέες καλλιέργειες χρησιμοποιώντας 2 έως 3 x 106 κύτταρα/ml. Μόλις τα κύτταρα ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης και απόψυξης μετά από 1 έως 2 περάσματα, ρυθμίστε την πυκνότητα των κυττάρων σε 1 x 106 κύτταρα/ml κατά τη διαίρεση των κυττάρων.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Περίπου το 53% του αρχικού αριθμού κυττάρων συλλέχθηκε μετά την κατάψυξη.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c
Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων