Tartalomra ugrás
Meth A sarcoma
Szövet
Bőr
Betegség
Fibroszarkóma
Szinonimák
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumentumok

Meth A sarcoma

Cell line · Termékszám 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Balb/c egerek kémiailag indukált tumorából származó Meth A szarkóma sejtek kulcsfontosságú modellt jelentenek a tumorbiológia és a szarkóma kialakulását irányító molekuláris mechanizmusok megértéséhez. A Meth A szarkóma sejtek kutatásának egyik kulcsfontosságú aspektusa a tumorszuppresszióban betöltött szerepéről ismert p53 transzformációval kapcsolatos fehérje tanulmányozása. A p53 jellemzően nagyon labilis, de stabilitása jelentősen megnövekszik számos olyan fibroszarkóma-sejtvonalban, amelyek fizikai vagy kémiai anyagokkal indukált tumorokból származnak. Ez a stabilizáció gyakran korrelál a hősokkfehérje hsc70 rokon fehérjével való stabil komplex kialakulásával.

Érdekes módon a Meth A szarkóma sejtek egyedi viselkedést mutatnak a p53 stabilitását illetően. Annak ellenére, hogy a p53 nagyon stabil ezekben a sejtekben, nincs kimutatható kölcsönhatás a hsc70-el. Ez arra utal, hogy az ilyen komplex kialakulásának képtelensége valószínűleg az endogén p53 elsődleges szerkezetének köszönhető. Ha más p53-variánsokat juttatunk Meth A szarkóma sejtekbe, akkor p53-hsc70 komplex képződik, ami azt jelzi, hogy a p53 elsődleges szerkezete kritikusan meghatározza a hsc70-el való kölcsönhatását, és következésképpen a stabilitását.

A stabil transzfekciós kísérletekkel végzett további vizsgálatok kimutatták, hogy a különböző p53-változatok különböző sebességgel degradálódnak a különböző transzformált sejttípusokban, ami hangsúlyozza a p53 elsődleges szerkezetének szerepét a turnover sebességének meghatározásában. Emellett a sejtkörnyezet is befolyásolja a p53 stabilitását, amint azt legalább egy p53-variáns eltérő lebomlási sebessége bizonyítja a nem transzformált BALB/c-3T3 sejtekben a transzformált fibroszarkóma sejtekhez képest. Ez rávilágít a genetikai tényezők és a sejtkörnyezet összetett kölcsönhatására a p53 stabilitásának és működésének szabályozásában a Meth A szarkóma sejtekben.

Szövet
Bőr
Betegség
Fibroszarkóma
Szinonimák
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kerek cellák
Daganatképző
Igen
Kettőzési idő
28-30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
Meth A szarkóma (Cytion katalógusszám: 400284)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Átültetés
Hagyja, hogy a sejtaggregátumok leülepedjenek a lombik aljára, öntse ki a felülúszó közeget, óvatosan pipettázással diszpergálja a sejteket, majd adagolja őket új lombikokba. A lombikban lévő sejtszuszpenziót reszuszpendálja, és vegyen belőle reprezentatív mintát a sejtek számának ml-ben történő megszámlálásához. A sejtszuszpenziót friss táptalajjal 1x105 sejt/ml-re hígítsa, majd új lombikokba helyezze át.
Ültetési sűrűség
Kezdjen új tenyészeteket 2–3 x 106 sejt/ml felhasználásával. Miután a sejtek 1–2 átvitel után felépültek a fagyasztás és felolvasztás folyamatából, a sejtek osztásakor állítsa be a sejtsűrűséget 1 x 106 sejt/ml értékre.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A fagyasztás után a kezdeti sejtszám mintegy 53%-át sikerült összegyűjteni.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
Felnőtt