Pereiti prie turinio
Meth A sarcoma
Audinys
Odos
Liga
Fibrosarkoma
Sinonimai
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumentai

Meth A sarcoma

Cell line · Prekės numeris 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Meth A sarkomos ląstelės, gautos iš cheminiu būdu sukelto Balb/c pelių naviko, yra labai svarbus naviko biologijos ir molekulinių mechanizmų, lemiančių sarkomos vystymąsi, supratimo modelis. Svarbiausias Meth A sarkomos ląstelių tyrimų aspektas yra su transformacija susijusio baltymo p53, žinomo dėl savo vaidmens slopinant naviką, tyrimas. Paprastai p53 yra labai labilus, tačiau jo stabilumas pastebimai padidėja daugelyje fibrosarkomos ląstelių linijų, gautų iš fizinių ar cheminių medžiagų sukeltų navikų. Šis stabilizavimas dažnai susijęs su stabilaus komplekso su šiluminio šoko baltymu hsc70 susidarymu.

Įdomu tai, kad Meth A sarkomos ląstelės pasižymi unikaliu elgesiu, susijusiu su p53 stabilumu. Nepaisant to, kad p53 šiose ląstelėse yra labai stabilus, jose neaptinkama sąveika su hsc70. Tai rodo, kad tokio komplekso nesugebėjimą sudaryti greičiausiai lemia pirminė endogeninio p53 struktūra. Kai į Meth A sarkomos ląsteles įterpiami kiti p53 variantai, p53 ir hsc70 kompleksas susidaro, o tai rodo, kad pirminė p53 struktūra lemia jo sąveiką su hsc70, taigi ir jo stabilumą.

Tolesni tyrimai naudojant stabilios transfekcijos eksperimentus atskleidė, kad skirtingi p53 variantai skirtingu greičiu suyra įvairiuose transformuotų ląstelių tipuose, pabrėžiant p53 pirminės struktūros vaidmenį nustatant jo apykaitos greitį. Be to, ląstelės aplinka taip pat turi įtakos p53 stabilumui, kaip matyti iš skirtingo bent vieno p53 varianto skaidymo greičio netransformuotose BALB/c-3T3 ląstelėse, palyginti su transformuotomis fibrosarkomos ląstelėmis. Tai rodo sudėtingą genetinių veiksnių ir ląstelinio konteksto sąveiką reguliuojant p53 stabilumą ir funkciją Meth A sarkomos ląstelėse.

Audinys
Odos
Liga
Fibrosarkoma
Sinonimai
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Tumorogeninis
Taip
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
28-30 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
Meth A sarkoma (Cytion katalogo numeris 400284)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Leiskite ląstelių agregatams nusėsti kolbos dugne, išpilkite viršutinį sluoksnį, švelniai pipetuojant išsklaidykite ląsteles ir perpilkite į naujas kolbas. Pakartotinai suspenduokite ląstelių suspensiją kolboje ir paimkite reprezentatyvią alikvotą dalį, kad suskaičiuotumėte ląstelių skaičių mililitre. Praskieskite ląstelių suspensiją iki 1x105 ląstelių/ml šviežia terpe ir perpilkite į naujas kolbas.
Sėjos tankis
Pradėkite naujas kultūras naudodami 2–3 x 106 ląstelių/ml. Kai ląstelės atsigaus po užšaldymo ir atšildymo proceso po 1–2 perdavimų, padalindami ląsteles nustatykite ląstelių tankį 1 x 106 ląstelių/ml.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Po užšaldymo buvo surinkta apie 53 % pradinio ląstelių skaičiaus.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
BALB/c
Donoro amžius
Suaugusiųjų