Skip to content
Meth A sarcoma
Tissue
ผิวหนัง
Disease
ไฟโบรซาร์โคมา
Synonyms
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Documents

Meth A sarcoma

Cell line · Product number 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ซาร์โคมา ซึ่งเป็นเซลล์มะเร็งที่เกิดจากเนื้องอกซึ่งถูกกระตุ้นด้วยสารเคมีในหนู Balb/c เป็นแบบจำลองที่สำคัญอย่างยิ่งสำหรับการทำความเข้าใจชีววิทยาของเนื้องอกและกลไกระดับโมเลกุลที่ขับเคลื่อนการพัฒนาของซาร์โคมาแง่มุมสำคัญของงานวิจัยเซลล์มะเร็งซาร์โคมาที่เกี่ยวข้องกับเมทแอมเฟตามีน คือการศึกษาโปรตีน p53 ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์และเป็นที่รู้จักในบทบาทการยับยั้งเนื้องอก โดยปกติแล้ว p53 จะมีความไม่เสถียรสูง แต่ความเสถียรของมันจะเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในหลายสายพันธุ์ของเซลล์ไฟโบรซาร์โคมาที่มีต้นกำเนิดจากเนื้องอกซึ่งถูกกระตุ้นโดยปัจจัยทางกายภาพหรือสารเคมี การเสถียรนี้มักสัมพันธ์กับการก่อตัวของสารประกอบที่เสถียรกับโปรตีนช็อกจากความร้อน hsc70

ที่น่าสนใจคือ เซลล์ซาร์โคมาของเมทเอแสดงพฤติกรรมเฉพาะตัวเกี่ยวกับความเสถียรของ p53 แม้ว่า p53 จะมีความเสถียรสูงในเซลล์เหล่านี้ แต่ก็ไม่พบการมีปฏิสัมพันธ์กับ hsc70สิ่งนี้บ่งชี้ว่าความไม่สามารถในการสร้างสารประกอบที่ซับซ้อนเช่นนี้น่าจะเกิดจากโครงสร้างหลักของ p53 ภายในร่างกาย เมื่อมีการนำ p53 ชนิดอื่นเข้าสู่เซลล์มะเร็งซาร์โคมา Meth A จะเกิดสารประกอบ p53-hsc70 ขึ้น ซึ่งแสดงให้เห็นว่าโครงสร้างหลักของ p53 เป็นปัจจัยสำคัญที่กำหนดการมีปฏิสัมพันธ์กับ hsc70 และส่งผลต่อความเสถียรของมัน

การสืบสวนเพิ่มเติมโดยใช้การทดลองการถ่ายโอนยีนอย่างคงที่ (stable transfection experiments) ได้เปิดเผยว่า p53 ชนิดต่าง ๆ ถูกทำลายในอัตราที่แตกต่างกันในเซลล์ชนิดต่าง ๆ ที่ถูกเปลี่ยนแปลง (transformed cell types) ซึ่งเน้นย้ำถึงบทบาทของโครงสร้างหลักของ p53 ในการกำหนดอัตราการสลายตัวของมันนอกจากนี้ สภาพแวดล้อมในเซลล์ยังมีอิทธิพลต่อความเสถียรของ p53 ซึ่งเห็นได้จากอัตราการสลายตัวที่แตกต่างกันของอย่างน้อยหนึ่งสายพันธุ์ของ p53 ในเซลล์ BALB/c-3T3 ที่ไม่เปลี่ยนแปลงเมื่อเทียบกับเซลล์ไฟโบรซาร์โคมาที่เปลี่ยนแปลงแล้ว สิ่งนี้เน้นย้ำถึงความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างปัจจัยทางพันธุกรรมและบริบทของเซลล์ในการควบคุมความเสถียรและการทำงานของ p53 ในเซลล์มะเร็งซาร์โคมา Meth A

Tissue
ผิวหนัง
Disease
ไฟโบรซาร์โคมา
Synonyms
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เซลล์กลม
Tumourigenic
ใช่
Doubling time
28 ถึง 30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
เมท เอ ซาร์โคมา (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400284)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Subculturing
ปล่อยให้ก้อนเซลล์ตกตะกอนลงที่ก้นขวดบ่ม แล้วเทส่วนใสด้านบนทิ้ง กระจายเซลล์ด้วยการปิเปตอย่างเบามือ จากนั้นแบ่งใส่ขวดบ่มใหม่ ละลายเซลล์ในขวดบ่มอีกครั้งและแบ่งตัวอย่างเพื่อนับจำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางเซลล์ในขวดบ่มด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ให้ได้ความเข้มข้น 1x105 เซลล์ต่อมิลลิลิตร แล้วถ่ายไปยังขวดบ่มใหม่
Seeding density
เริ่มต้นวัฒนธรรมใหม่โดยใช้เซลล์ 2 ถึง 3 x 106 เซลล์/มล. เมื่อเซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและละลายแล้วหลังจากผ่าน 1 ถึง 2 ครั้ง ให้ปรับความหนาแน่นของเซลล์เป็น 1 x 106 เซลล์/มล. เมื่อทำการแบ่งเซลล์
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
ประมาณ 53% ของจำนวนเซลล์เริ่มต้นถูกเก็บรวบรวมหลังการแช่แข็ง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
ผู้ใหญ่