Ir diretamente para o conteúdo
Meth A sarcoma
Tecido
Pele
Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Documentos

Meth A sarcoma

Cell line · Número do produto 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

As células do sarcoma Meth A, provenientes de um tumor induzido quimicamente em ratinhos Balb/c, constituem um modelo crucial para a compreensão da biologia tumoral e dos mecanismos moleculares que determinam o desenvolvimento do sarcoma. Um aspeto fundamental da investigação das células do sarcoma Meth A envolve o estudo da proteína p53 relacionada com a transformação, conhecida pelo seu papel na supressão de tumores. Normalmente, a p53 é altamente lábil, mas a sua estabilidade é acentuadamente aumentada em muitas linhas celulares de fibrossarcoma derivadas de tumores induzidos por agentes físicos ou químicos. Esta estabilização está frequentemente relacionada com a formação de um complexo estável com a proteína de choque térmico cognata hsc70.

Curiosamente, as células de sarcoma Meth A apresentam um comportamento único relativamente à estabilidade do p53. Apesar de o p53 ser muito estável nestas células, não há interação detetável com a hsc70. Isto sugere que a incapacidade de formar um tal complexo se deve provavelmente à estrutura primária do p53 endógeno. Quando outras variantes do p53 são introduzidas nas células do sarcoma Meth A, forma-se um complexo p53-hsc70, o que indica que a estrutura primária do p53 é um determinante crítico da sua interação com o hsc70 e, consequentemente, da sua estabilidade.

Outras investigações, utilizando experiências de transfecção estável, revelaram que diferentes variantes de p53 são degradadas a taxas distintas em vários tipos de células transformadas, sublinhando o papel da estrutura primária do p53 na determinação da sua taxa de renovação. Além disso, o ambiente celular também influencia a estabilidade do p53, como evidenciado pelas diferentes taxas de degradação de pelo menos uma variante do p53 em células BALB/c-3T3 não transformadas em comparação com células de fibrossarcoma transformadas. Isto realça a complexa interação entre os factores genéticos e o contexto celular na regulação da estabilidade e função do p53 nas células do sarcoma Meth A.

Tecido
Pele
Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas
Tumorigénico
Sim
Tempo de duplicação
28 a 30 horas

04Identificadores

Referência
Sarcoma Meth A (número de catálogo Cytion 400284)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Deixe os agregados celulares assentarem no fundo do frasco, descarte o meio sobrenadante, disperse as células com pipetagem suave e distribua em novos frascos. Resuspender a suspensão celular no frasco e retirar uma alíquota representativa para contar o número de células por ml. Diluir a suspensão celular para 1x105 células/ml com meio fresco e transferir para novos frascos.
Densidade de sementeira
Inicie novas culturas utilizando 2 a 3 x 10⁶ células/ml. Assim que as células se recuperarem do processo de congelamento e descongelamento após 1 a 2 passagens, ajuste a densidade celular para 1 x 10⁶ células/ml ao dividir as células.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Cerca de 53% do número inicial de células foi recolhido após a congelação.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
Adulto