Gå til innholdet
Meth A sarcoma
Vev
Hud
Sykdom
Fibrosarkom
Synonymer
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumenter

Meth A sarcoma

Cell line · Produktnummer 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Meth A-sarkomceller, som stammer fra en kjemisk indusert svulst i Balb/c-mus, er en viktig modell for å forstå tumorbiologi og de molekylære mekanismene som driver sarkomutviklingen. Et sentralt aspekt ved forskningen på Meth A-sarkomceller er studiet av det transformasjonsrelaterte proteinet p53, som er kjent for sin rolle i tumorundertrykkelse. Vanligvis er p53 svært labilt, men stabiliteten er markant økt i mange fibrosarkomcellelinjer som stammer fra svulster som er indusert av fysiske eller kjemiske stoffer. Denne stabiliseringen korrelerer ofte med dannelsen av et stabilt kompleks med varmesjokkproteinet hsc70.

Interessant nok viser Meth A-sarkomceller en unik oppførsel når det gjelder p53-stabilitet. Til tross for at p53 er svært stabilt i disse cellene, er det ingen påviselig interaksjon med hsc70. Dette tyder på at den manglende evnen til å danne et slikt kompleks sannsynligvis skyldes den primære strukturen til det endogene p53. Når andre p53-varianter introduseres i Meth A-sarkomceller, dannes det et p53-hsc70-kompleks, noe som indikerer at den primære strukturen til p53 er en avgjørende faktor for interaksjonen med hsc70 og dermed også for stabiliteten.

Ytterligere undersøkelser ved hjelp av stabile transfeksjonseksperimenter har avdekket at ulike p53-varianter brytes ned med ulik hastighet i forskjellige transformerte celletyper, noe som understreker betydningen av p53s primærstruktur for nedbrytningshastigheten. I tillegg påvirker også det cellulære miljøet p53-stabiliteten, noe som fremgår av ulik nedbrytningshastighet for minst én p53-variant i ikke-transformerte BALB/c-3T3-celler sammenlignet med transformerte fibrosarkomceller. Dette understreker det komplekse samspillet mellom genetiske faktorer og cellulær kontekst i reguleringen av p53-stabilitet og -funksjon i Meth A-sarkomceller.

Vev
Hud
Sykdom
Fibrosarkom
Synonymer
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Tumorinduserende
Ja
Fordoblingstid
28 til 30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Meth A-sarkom (Cytion katalognummer 400284)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
La celleaggregatene synke til bunnen av kolben, kast det overflødige mediet, spred cellene ved forsiktig pipettering og dispensér dem i nye kolber. Resuspender cellesuspensjonen i kolben og ta en representativ alikvot for å telle antall celler per ml. Fortynn cellesuspensjonen til 1x105 celler/ml med ferskt medium og overfør til nye kolber.
Såtetthet
Start nye kulturer med 2 til 3 x 106 celler/ml. Når cellene har kommet seg etter frysing og tining etter 1 til 2 passeringer, juster celletettheten til 1 x 106 celler/ml når cellene deles.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Omtrent 53 % av det opprinnelige celleantallet ble samlet inn etter frysing.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
BALB/c
Donorens alder
Voksen