الانتقال إلى المحتوى
Meth A sarcoma
الأنسجة
البشرة
المرض
الساركوما الليفية
المرادفات
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

المستندات

Meth A sarcoma

Cell line · رقم المنتج 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

توفر خلايا ساركوما ميث أ، التي تنشأ من ورم مستحث كيميائياً في فئران Balb/c، نموذجاً حاسماً لفهم بيولوجيا الورم والآليات الجزيئية التي تقود تطور الساركوما. ينطوي أحد الجوانب الرئيسية لأبحاث خلايا ساركوما ميث أ على دراسة البروتين p53 المرتبط بالتحول والمعروف بدوره في قمع الورم. وعادةً ما يكون بروتين p53 قابلاً للتحول بشكل كبير، ولكن استقراره يزداد بشكل ملحوظ في العديد من خطوط خلايا الساركوما الليفية المشتقة من الأورام التي تحفزها عوامل فيزيائية أو كيميائية. وغالبًا ما يرتبط هذا الاستقرار بتكوين مركب مستقر مع بروتين الصدمة الحرارية المتوافق مع بروتين الصدمة الحرارية hsc70.

ومن المثير للاهتمام أن خلايا ساركوما ميث أ تُظهر سلوكًا فريدًا فيما يتعلق باستقرار بروتين p53. فعلى الرغم من أن بروتين p53 مستقر للغاية في هذه الخلايا، إلا أنه لا يوجد تفاعل يمكن اكتشافه مع بروتين الصدمة الحرارية hsc70. وهذا يشير إلى أن عدم القدرة على تكوين مثل هذا المركب يرجع على الأرجح إلى البنية الأساسية للمادة p53 الذاتية المنشأ. عندما يتم إدخال متغيرات p53 الأخرى في خلايا ساركوما ميث أ، يتشكل مركب p53- hsc70، مما يشير إلى أن البنية الأولية ل p53 هي العامل الحاسم في تفاعله مع hsc70، وبالتالي استقراره.

وقد كشفت المزيد من التحقيقات باستخدام تجارب نقل العدوى المستقرة أن متغيرات p53 المختلفة تتحلل بمعدلات مختلفة في أنواع مختلفة من الخلايا المتحولة، مما يؤكد دور البنية الأساسية ل p53 في تحديد معدل دورانها. بالإضافة إلى ذلك، تؤثر البيئة الخلوية أيضًا على استقرار p53، كما يتضح من اختلاف معدلات التحلل لمتغير p53 واحد على الأقل في خلايا BALB/c-3T3 غير المتحولة مقارنةً بخلايا الساركوما الليفية المتحولة. يسلط هذا الضوء على التفاعل المعقد بين العوامل الوراثية والسياق الخلوي في تنظيم استقرار p53 ووظيفته في خلايا الساركوما الليفية الميثية.

الأنسجة
البشرة
المرض
الساركوما الليفية
المرادفات
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية
مُسبِّب للأورام
نعم
زمن المضاعفة
من 28 إلى 30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
ساركوما ميث أ (كتالوج سيتيون رقم 400284)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_5798

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
اترك تراكمات الخلايا تستقر في قاع القارورة، وتخلص من الوسط الطافي، وقم بتفريق الخلايا بواسطة ماصة لطيفة وقم بتوزيعها في قوارير جديدة. أعد تعليق المعلق الخلوي في القارورة وأخذ عينة تمثيلية لحساب عدد الخلايا لكل مل. قم بتخفيف المعلق الخلوي إلى 1x105 خلية/مل باستخدام وسط جديد وانقله إلى قوارير جديدة.
كثافة البذر
ابدأ ثقافات جديدة باستخدام 2 إلى 3 × 106 خلية/مل. بمجرد أن تتعافى الخلايا من عملية التجميد والذوبان بعد 1 إلى 2 ممرات، اضبط كثافة الخلايا على 1 × 106 خلية/مل عند تقسيم الخلايا.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
تم جمع حوالي 53% من عدد الخلايا الأولي بعد التجميد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
للبالغين