Gå direkte til indholdet
Meth A sarcoma
Væv
Hud
Sygdom
Fibrosarkom
Synonymer
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumenter

Meth A sarcoma

Cell line · Varenummer 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Meth A-sarkomceller, der stammer fra en kemisk induceret tumor i Balb/c-mus, er en vigtig model til at forstå tumorbiologi og de molekylære mekanismer, der driver sarkomudvikling. Et centralt aspekt af forskningen i Meth A-sarkomceller er studiet af det transformationsrelaterede protein p53, der er kendt for sin rolle i tumorundertrykkelse. Typisk er p53 meget labilt, men dets stabilitet er markant øget i mange fibrosarkomcellelinjer, der stammer fra tumorer fremkaldt af fysiske eller kemiske stoffer. Denne stabilisering hænger ofte sammen med dannelsen af et stabilt kompleks med varmechokproteinet hsc70.

Interessant nok udviser Meth A-sarkomceller en unik adfærd med hensyn til p53-stabilitet. På trods af at p53 er meget stabilt i disse celler, er der ingen påviselig interaktion med hsc70. Det tyder på, at den manglende evne til at danne et sådant kompleks sandsynligvis skyldes den primære struktur af det endogene p53. Når andre p53-varianter introduceres i Meth A-sarkomceller, dannes der et p53-hsc70-kompleks, hvilket indikerer, at den primære struktur af p53 er en afgørende faktor for dets interaktion med hsc70 og dermed dets stabilitet.

Yderligere undersøgelser ved hjælp af stabile transfektionseksperimenter har afsløret, at forskellige p53-varianter nedbrydes med forskellige hastigheder i forskellige transformerede celletyper, hvilket understreger den rolle, som p53's primære struktur spiller i bestemmelsen af dens omsætningshastighed. Derudover påvirker det cellulære miljø også p53-stabiliteten, hvilket fremgår af forskellige nedbrydningshastigheder for mindst én p53-variant i ikke-transformerede BALB/c-3T3-celler sammenlignet med transformerede fibrosarkomceller. Dette fremhæver det komplekse samspil mellem genetiske faktorer og cellulær kontekst i reguleringen af p53-stabilitet og -funktion i Meth A-sarkomceller.

Væv
Hud
Sygdom
Fibrosarkom
Synonymer
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Tumorfremkaldende
Yeees
Fordoblingstid
28 til 30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Meth A sarkom (Cytion katalognummer 400284)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Lad celleaggregaterne bundfælde sig i bunden af kolben, kassér det overflødige medium, spred cellerne ved forsigtig pipettering og hæld dem over i nye kolber. Resuspender cellesuspensionen i kolben og tag en repræsentativ alikvot for at tælle antallet af celler pr. ml. Fortynd cellesuspensionen til 1x105 celler/ml med frisk medium og overfør den til nye kolber.
Såtæthed
Start nye kulturer med 2 til 3 x 106 celler/ml. Når cellerne har genoprettet sig efter frysning og optøning efter 1 til 2 passager, skal celletætheden justeres til 1 x 106 celler/ml, når cellerne deles.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Omkring 53% af det oprindelige celletal blev indsamlet efter nedfrysning.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
BALB/c
Donorens alder
Voksen