Přejít na obsah
Meth A sarcoma
Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumenty

Meth A sarcoma

Cell line · Číslo výrobku 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Sarkomové buňky Meth A, pocházející z chemicky indukovaného nádoru u myší Balb/c, představují zásadní model pro pochopení biologie nádorů a molekulárních mechanismů, které jsou příčinou vzniku sarkomu. Klíčovým aspektem výzkumu sarkomových buněk Meth A je studium proteinu p53 souvisejícího s transformací, který je známý svou úlohou při potlačování nádorů. Typicky je p53 vysoce labilní, ale jeho stabilita je výrazně zvýšena v mnoha fibrosarkomových buněčných liniích odvozených z nádorů vyvolaných fyzikálními nebo chemickými látkami. Tato stabilizace často koreluje s tvorbou stabilního komplexu s příbuzným proteinem tepelného šoku hsc70.

Zajímavé je, že sarkomové buňky Meth A vykazují jedinečné chování, pokud jde o stabilitu p53. Přestože je p53 v těchto buňkách velmi stabilní, nedochází u něj k detekovatelné interakci s hsc70. To naznačuje, že neschopnost vytvořit takový komplex je pravděpodobně způsobena primární strukturou endogenního p53. Když se do buněk sarkomu Meth A vnesou jiné varianty p53, komplex p53-hsc70 se vytvoří, což naznačuje, že primární struktura p53 je rozhodující pro jeho interakci s hsc70 a následně pro jeho stabilitu.

Další zkoumání pomocí stabilních transfekčních experimentů odhalilo, že různé varianty p53 jsou v různých transformovaných typech buněk degradovány různou rychlostí, což zdůrazňuje roli primární struktury p53 při určování rychlosti jeho obratu. Kromě toho buněčné prostředí také ovlivňuje stabilitu p53, jak dokládá rozdílná rychlost degradace alespoň jedné varianty p53 v netransformovaných buňkách BALB/c-3T3 ve srovnání s transformovanými buňkami fibrosarkomu. To poukazuje na složitou souhru genetických faktorů a buněčného kontextu při regulaci stability a funkce p53 v buňkách sarkomu Meth A.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky
Tumorogenní
Ano
Doba zdvojnásobení
28 až 30 hodin

04Identifikátory

Citace
Sarkom Meth A (katalogové číslo Cytion 400284)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Nechte buněčné agregáty usadit se na dně baňky, zlikvidujte supernatantní médium, rozptylte buňky jemným pipetováním a rozdělte je do nových baněk. Resuspendujte buněčnou suspenzi v baňce a odeberte reprezentativní alikvotní část pro spočítání počtu buněk na ml. Zřeďte buněčnou suspenzi na 1x105 buněk/ml čerstvým médiem a přeneste do nových baněk.
Hustota výsevu
Nové kultury zahajte s použitím 2 až 3 x 106 buněk/ml. Jakmile se buňky zotaví z procesu zmrazení a rozmrazení po 1 až 2 pasážích, při dělení buněk upravte hustotu buněk na 1 x 106 buněk/ml.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po zmrazení bylo získáno přibližně 53 % původního počtu buněk.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
Dospělí