İçeriğe atla
Meth A sarcoma
Doku
Cilt
Hastalık
Fibrosarkom
Eş anlamlılar
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Meth A sarcoma

Cell line · Ürün numarası 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Balb/c farelerinde kimyasal olarak indüklenen bir tümörden kaynaklanan Meth A sarkom hücreleri, tümör biyolojisini ve sarkom gelişimini yönlendiren moleküler mekanizmaları anlamak için çok önemli bir model sağlar. Meth A sarkom hücresi araştırmasının önemli bir yönü, tümör baskılanmasındaki rolüyle bilinen dönüşümle ilgili protein p53'ün incelenmesini içerir. Tipik olarak p53 oldukça değişkendir, ancak fiziksel veya kimyasal ajanlarla indüklenen tümörlerden türetilen birçok fibrosarkom hücre hattında stabilitesi belirgin şekilde artar. Bu stabilizasyon genellikle ısı şoku proteini hsc70 ile stabil bir kompleks oluşumu ile ilişkilidir.

İlginç bir şekilde, Meth A sarkom hücreleri p53 stabilitesi açısından benzersiz bir davranış sergilemektedir. Bu hücrelerde p53 çok kararlı olmasına rağmen, hsc70 ile tespit edilebilir bir etkileşim yoktur. Bu, böyle bir kompleks oluşturamamanın muhtemelen endojen p53'ün birincil yapısından kaynaklandığını göstermektedir. Meth A sarkom hücrelerine diğer p53 varyantları eklendiğinde, bir p53-hsc70 kompleksi oluşur, bu da p53'ün birincil yapısının hsc70 ile etkileşiminin ve sonuç olarak stabilitesinin kritik bir belirleyicisi olduğunu gösterir.

Kararlı transfeksiyon deneyleri kullanılarak yapılan daha ileri araştırmalar, farklı p53 varyantlarının çeşitli dönüştürülmüş hücre tiplerinde farklı oranlarda parçalandığını ortaya koymuş ve p53'ün birincil yapısının devir hızını belirlemedeki rolünü vurgulamıştır. Buna ek olarak, hücresel ortam da p53 stabilitesini etkilemektedir; bunun kanıtı, transformasyona uğramamış BALB/c-3T3 hücrelerinde transformasyona uğramış fibrosarkom hücrelerine kıyasla en az bir p53 varyantının farklı bozunma oranlarıdır. Bu durum, Meth A sarkom hücrelerinde p53 stabilitesinin ve işlevinin düzenlenmesinde genetik faktörler ile hücresel bağlam arasındaki karmaşık etkileşimi vurgulamaktadır.

Doku
Cilt
Hastalık
Fibrosarkom
Eş anlamlılar
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Yuvarlak hücreler
Tümör oluşturucu
Evet
İki katına çıkma süresi
28 ila 30 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Meth A sarkomu (Cytion katalog numarası 400284)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Hücre agregatlarının şişenin dibine çökmesine izin verin, süpernatant ortamı atın, hücreleri nazikçe pipetleyerek dağıtın ve yeni şişelere aktarın. Şişedeki hücre süspansiyonunu yeniden süspansiyon haline getirin ve ml başına hücre sayısını saymak için temsil edici bir alikot alın. Hücre süspansiyonunu taze ortamla 1x105 hücre/ml'ye seyreltin ve yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 ila 3 x 106 hücre/ml kullanarak yeni kültürler başlatın. Hücreler 1 ila 2 geçişten sonra dondurma ve çözme işleminden kurtulduktan sonra, hücreleri bölerek hücre yoğunluğunu 1 x 106 hücre/ml olarak ayarlayın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Dondurulduktan sonra başlangıçtaki hücre sayısının yaklaşık %53'ü toplanmıştır.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
Yetişkin