Przejdź do treści
Meth A sarcoma
Chusteczka
Skóra
Choroba
Włókniakomięsak
Synonimy
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumenty

Meth A sarcoma

Cell line · Numer produktu 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki mięsaka Meth A, pochodzące z chemicznie indukowanego guza u myszy Balb/c, stanowią kluczowy model do zrozumienia biologii nowotworów i mechanizmów molekularnych napędzających rozwój mięsaka. Kluczowy aspekt badań nad komórkami mięsaka Meth A obejmuje badanie białka p53 związanego z transformacją, znanego ze swojej roli w hamowaniu nowotworów. Zazwyczaj p53 jest wysoce labilne, ale jego stabilność jest znacznie zwiększona w wielu liniach komórkowych włókniakomięsaka pochodzących z guzów indukowanych czynnikami fizycznymi lub chemicznymi. Stabilizacja ta często koreluje z tworzeniem stabilnego kompleksu z białkiem szoku cieplnego hsc70.

Co ciekawe, komórki mięsaka Meth A wykazują unikalne zachowanie w odniesieniu do stabilności p53. Pomimo tego, że p53 jest bardzo stabilny w tych komórkach, nie ma wykrywalnej interakcji z hsc70. Sugeruje to, że niezdolność do utworzenia takiego kompleksu jest prawdopodobnie spowodowana pierwotną strukturą endogennego p53. Gdy inne warianty p53 są wprowadzane do komórek mięsaka Meth A, tworzy się kompleks p53-hsc70, co wskazuje, że pierwotna struktura p53 jest krytycznym czynnikiem determinującym jego interakcję z hsc70, a w konsekwencji jego stabilność.

Dalsze badania z wykorzystaniem eksperymentów stabilnej transfekcji ujawniły, że różne warianty p53 są degradowane w różnym tempie w różnych typach transformowanych komórek, podkreślając rolę pierwotnej struktury p53 w określaniu szybkości jego obrotu. Dodatkowo, środowisko komórkowe również wpływa na stabilność p53, o czym świadczą różne szybkości degradacji co najmniej jednego wariantu p53 w nietransformowanych komórkach BALB/c-3T3 w porównaniu z transformowanymi komórkami włókniakomięsaka. Podkreśla to złożoną interakcję między czynnikami genetycznymi i kontekstem komórkowym w regulacji stabilności i funkcji p53 w komórkach mięsaka Meth A.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Włókniakomięsak
Synonimy
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki
Nowotworotwórczy
Tak
Czas podwojenia
28 do 30 godzin

04Identyfikatory

Źródło
Mięsak Meth A (numer katalogowy Cytion 400284)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Pozwól agregatom komórek osiadać na dnie kolby, odrzuć supernatant, rozprowadź komórki delikatnym pipetowaniem i przelej do nowych kolb. Ponownie zawieszaj zawiesinę komórek w kolbie i pobierz reprezentatywną porcję, aby policzyć liczbę komórek na ml. Rozcieńcz zawiesinę komórek do 1x105 komórek/ml świeżym podłożem i przenieś do nowych kolb.
Gęstość wysiewu
Rozpocznij nowe hodowle, używając 2 do 3 x 106 komórek/ml. Gdy komórki odzyskają sprawność po procesie zamrażania i rozmrażania po 1 do 2 pasażach, dostosuj gęstość komórek do 1 x 106 komórek/ml podczas dzielenia komórek.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po zamrożeniu zebrano około 53% początkowej liczby komórek.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
Dorosły