Перейти до вмісту
Meth A sarcoma
Тканина
Шкіра
Хвороба
Фібросаркома
Синоніми
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Документи

Meth A sarcoma

Cell line · Номер товару 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини саркоми Meth A, що походять з хімічно індукованої пухлини у мишей лінії Balb/c, є важливою моделлю для розуміння біології пухлин і молекулярних механізмів розвитку саркоми. Ключовим аспектом дослідження клітин саркоми Meth A є вивчення пов'язаного з трансформацією білка p53, відомого своєю роллю в пригніченні пухлин. Зазвичай р53 є дуже лабільним, але його стабільність помітно підвищується в багатьох лініях клітин фібросаркоми, отриманих з пухлин, індукованих фізичними або хімічними агентами. Ця стабілізація часто корелює з утворенням стабільного комплексу зі спорідненим білком теплового шоку hsc70.

Цікаво, що клітини саркоми Meth A демонструють унікальну поведінку щодо стабільності р53. Незважаючи на те, що р53 є дуже стабільним у цих клітинах, не спостерігається жодної взаємодії з hsc70. Це свідчить про те, що нездатність утворювати такий комплекс, ймовірно, пов'язана з первинною структурою ендогенного р53. При введенні інших варіантів p53 в клітини саркоми Meth A комплекс p53-hsc70 утворюється, що вказує на те, що первинна структура p53 є критичною детермінантою його взаємодії з hsc70 і, отже, його стабільності.

Подальші дослідження з використанням експериментів зі стабільної трансфекції показали, що різні варіанти р53 деградують з різною швидкістю в різних трансформованих типах клітин, що підкреслює роль первинної структури р53 у визначенні швидкості його обороту. Крім того, клітинне середовище також впливає на стабільність р53, про що свідчать різні швидкості деградації принаймні одного варіанту р53 в нетрансформованих клітинах BALB/c-3T3 порівняно з трансформованими клітинами фібросаркоми. Це підкреслює складну взаємодію між генетичними факторами та клітинним контекстом у регуляції стабільності та функції р53 у клітинах саркоми Meth A.

Тканина
Шкіра
Хвороба
Фібросаркома
Синоніми
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Круглі клітини
Пухлиноутворювальний
Так
Час подвоєння
від 28 до 30 годин

04Ідентифікатори

Посилання
Саркома метастазів (номер за каталогом Cytion 400284)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_5798

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Пересадка в нове середовище
Дайте клітинним агрегатам осісти на дно колби, видаліть надлишкове середовище, розведіть клітини обережним піпетуванням і перелийте в нові колби. Ресуспендуйте клітинну суспензію в колбі і візьміть репрезентативну аліквоту для підрахунку кількості клітин на мл. Розведіть клітинну суспензію до 1x105 клітин/мл свіжим середовищем і перелийте в нові колби.
Щільність висіву
Почніть нові культури, використовуючи 2–3 × 106 клітин/мл. Після того як клітини відновляться від процесу заморожування та розморожування після 1–2 пасажів, під час поділу клітин відрегулюйте щільність клітин до 1 × 106 клітин/мл.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після заморожування було зібрано близько 53% від початкової кількості клітин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
BALB/c
Вік донора
Дорослий