Mine otse sisu juurde
Meth A sarcoma
Kude
Nahk
Haigus
Fibrosarkoom
Sünonüümid
Meth A, Meth-A, Meth-A-sarkom

Dokumendid

Meth A sarcoma

Cell line · Toote number 400284

Meth A sarcoma cells, originating from a chemically induced tumor in Balb/c mice, provide a crucial model for understanding tumor biology and the molecula...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Meth A sarkoomirakud, mis pärinevad Balb/c-hiirte keemiliselt indutseeritud kasvajast, on oluline mudel kasvajate bioloogia ja sarkoomi arengut juhtivate molekulaarmehhanismide mõistmiseks. Meth A sarkoomirakkude uurimise oluline aspekt on transformeerumisega seotud valgu p53 uurimine, mis on tuntud oma rolli poolest kasvajate pärssimises. Tavaliselt on p53 väga labiilne, kuid selle stabiilsus on märgatavalt suurenenud paljudes fibrosarkoomi rakuliinides, mis on saadud füüsikaliste või keemiliste ainetega indutseeritud kasvajatest. See stabiliseerumine on sageli seotud stabiilse kompleksi moodustamisega soojusšokivalkoopiaga hsc70.

Huvitaval kombel on Meth A sarkoomirakkudel ainulaadne käitumine seoses p53 stabiilsusega. Hoolimata sellest, et p53 on nendes rakkudes väga stabiilne, ei ole hsc70-ga tuvastatavat koostoimet. See viitab sellele, et sellise kompleksi moodustamise võimetus on tõenäoliselt tingitud endogeense p53 primaarsest struktuurist. Kui Meth A sarkoomi rakkudesse viiakse teisi p53 variante, moodustub p53-hsc70 kompleks, mis näitab, et p53 esmane struktuur on kriitiline tegur, mis määrab selle koostoime hsc70-ga ja seega ka stabiilsuse.

Edasised uuringud stabiilse transfektsiooni katsete abil on näidanud, et erinevad p53-variandid lagunevad eri tüüpi transformeeritud rakkudes erineva kiirusega, mis rõhutab p53 primaarse struktuuri rolli p53 käibemäära määramisel. Lisaks sellele mõjutab p53 stabiilsust ka rakukeskkond, nagu näitab vähemalt ühe p53 variandi erinev lagunemiskiirus transformeerimata BALB/c-3T3 rakkudes võrreldes transformeeritud fibrosarkoomirakkudega. See toob esile geneetiliste tegurite ja rakukonteksti keerulise koosmõju p53 stabiilsuse ja funktsiooni reguleerimisel Meth A sarkoomi rakkudes.

Kude
Nahk
Haigus
Fibrosarkoom
Sünonüümid
  • Meth A
  • Meth-A
  • Meth-A-sarkom

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Tuumorigeenne
Jah
Kahekordistumisaeg
28-30 tundi

04Tunnused

Viide
Meth A sarkoom (Cytioni katalooginumber 400284)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5798

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Laske rakkude agregaatidel settida kolbi põhja, visake supernatant ära, hajutage rakud õrnalt pipeteerides ja jaotage uude kolbi. Resuspendeerige rakususpensioon kolbis ja võtke representatiivne alikvoot, et loendada rakkude arv ml kohta. Lahjendage rakususpensioon värske keskkonnaga 1x105 rakku/ml ja kandke uude kolbi.
Külvitihedus
Alustage uusi kultuure, kasutades 2–3 x 106 rakku/ml. Kui rakud on pärast 1–2 passaaži külmutamis- ja sulatamisprotsessist taastunud, reguleerige rakkude jagamisel rakkude tihedus 1 x 106 rakku/ml.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast külmutamist koguti umbes 53% esialgsest rakkude arvust.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Täiskasvanud