hCMEC/D3

קו התאים HCMEC/D3 מייצג קו תאים אנדותל מיקרווסקולריים מוחיים אנושיים שהפכו לבלתי מתכלים, המשמשים רבות במחקר על מחסום הדם-מוח (BBB). קו תאים זה נוצר באמצעות העברה של תאי אנדותל מיקרווסקולריים מוחיים אנושיים ראשוניים באמצעות וקטור לנטוירוס המבטא את האנזים telomerase reverse transcriptase (hTERT) האנושי, אנזים חיוני לשמירה על אורך הטלומרים ובכך לקידום אריכות החיים התאית מבלי לשנות את הפנוטיפ התאי. הכנסת ה-hTERT מסייעת לתאים אלה לעקוף את הזקנה הרפליקטיבית המגבילה את תוחלת החיים של תאים ראשוניים, ומאפשרת התרבות מתמשכת בתרבית.

תאי HCMEC/D3 שומרים על מאפיינים פיזיולוגיים ומורפולוגיים מרכזיים של תאי אנדותל מוחיים ראשוניים, מה שהופך אותם למודל חשוב למחקרים במבחנה על מחסום הדם-מוח. מאפיינים אלה כוללים ביטוי של חלבוני חיבור הדוקים כגון claudin-5, occludin ו-zonula occludens-1, החיוניים לשמירה על שלמות המחסום. התאים מבטאים גם מגוון מובילי קולטנים וקולטנים האופייניים לאנדותל המוחי, מה שתומך בשימוש בהם במחקרים הקשורים להעברת תרופות והפרעות נוירווסקולריות. היכולת של HCMEC/D3 ליצור שכבה חד-תאית הדוקה עם התנגדות חשמלית גבוהה מדגישה את התאמתם לבדיקות חדירות BBB.

מחקרים המשתמשים בתאי HCMEC/D3 כיסו מגוון רחב של יישומים, כולל חקירת פתולוגיות מוחיות כגון שבץ, טרשת נפוצה וגרורות סרטן למוח. תאי HCMEC/D3 תואמים לטכניקות ביולוגיה מולקולרית שונות, מה שהופך אותם לכלי מצוין לחקר תגובות תאי האנדותל לגירויים דלקתיים, לחץ גזירה וחומרים נוירוטוקסיים. קו תאים זה מספק פלטפורמה איתנה וניתנת לשחזור לניתוח האירועים המולקולריים ברמת האנדותל המוחי, ותורם תובנות חשובות על המורכבות של בריאות ומחלות נוירווסקולריות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו