hCMEC/D3

HCMEC/D3-solulinja on kuolematon ihmisen aivojen mikrovaskulaarinen endoteelisolulinja, jota käytetään laajalti veri-aivoesteen (BBB) tutkimuksessa. Tämä solulinja luotiin transduktioimalla primaarisia ihmisen aivojen mikrovaskulaarisia endoteelisoluja lentiviraalivektorilla, joka ilmentää ihmisen telomeraasin käänteistranskriptaasia (hTERT), joka on ratkaisevan tärkeä entsyymi telomeerien pituuden ylläpitämisessä ja siten solujen pitkäikäisyyden edistämisessä muuttamatta solujen fenotyyppiä. HTERT:n käyttöönotto auttaa näitä soluja ohittamaan replikatiivisen senesenssin, joka rajoittaa primaarisolujen elinikää, ja mahdollistaa niiden jatkuvan lisääntymisen viljelyssä.

HCMEC/D3-solut säilyttävät primaaristen aivojen endoteelisolujen keskeiset fysiologiset ja morfologiset ominaisuudet, mikä tekee niistä arvokkaan mallin BBB:n in vitro -tutkimuksiin. Näihin kuuluu muun muassa tiukkojen liitosproteiinien, kuten claudin-5:n, okkludiinin ja zonula occludens-1:n, ilmentyminen, jotka ovat kriittisiä esteen eheyden ylläpitämisen kannalta. Solut ilmentävät myös erilaisia aivojen endoteelille tyypillisiä kuljettajia ja reseptoreita, mikä tukee niiden käyttöä lääkkeiden annosteluun ja neurovaskulaarisiin häiriöihin liittyvissä tutkimuksissa. HCMEC/D3:n kyky muodostaa tiivis monokerros, jolla on korkea sähköinen vastus, korostaa niiden soveltuvuutta BBB:n läpäisevyysmäärityksiin.

HCMEC/D3-soluja hyödyntävä tutkimus on kattanut laajan valikoiman sovelluksia, mukaan lukien aivopatologioiden, kuten aivohalvauksen, multippeliskleroosin ja syövän etäpesäkkeiden tutkiminen aivoihin. Niiden yhteensopivuus erilaisten molekyylibiologisten tekniikoiden kanssa tekee niistä myös erinomaisen välineen tutkia endoteelisolujen vasteita tulehdusärsykkeille, leikkausstressille ja neurotoksisille aineille. Tämä solulinja tarjoaa vankan, toistettavissa olevan alustan molekulaaristen tapahtumien analysoimiseksi aivojen endoteelitasolla, mikä antaa arvokasta tietoa neurovaskulaarisen terveyden ja sairauksien monimutkaisuudesta.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa