hCMEC/D3

A HCMEC/D3 sejtvonal egy immortalizált humán agyi mikrovaszkuláris endotél sejtvonal, amelyet széles körben használnak a vér-agy gát (BBB) tanulmányozásában. Ezt a sejtvonalat primer humán agyi mikrovaszkuláris endotélsejtek transzdukciójával hozták létre, olyan lentivirális vektorral, amely humán telomeráz reverz transzkriptázt (hTERT) expresszál, amely a telomer hosszának fenntartásában kulcsfontosságú enzim, és ezáltal elősegíti a sejtek hosszú élettartamát a sejtfenotípus átalakítása nélkül. A hTERT bevezetése segít ezeknek a sejteknek abban, hogy megkerüljék a replikatív szeneszcenciát, amely korlátozza az elsődleges sejtek élettartamát, lehetővé téve a tartós szaporodást a kultúrában.

A HCMEC/D3 sejtek megőrzik a primer agyi endotélsejtek kulcsfontosságú fiziológiai és morfológiai jellemzőit, így értékes modellként szolgálnak a BBB in vitro vizsgálatához. Ezek közé tartozik a szoros kötés fehérjéinek, például a claudin-5, az occludin és a zonula occludens-1 expressziója, amelyek kritikusak a barrier integritásának fenntartásában. A sejtek az agyi endothelre jellemző különböző transzportereket és receptorokat is expresszálnak, ami alátámasztja felhasználásukat a gyógyszeradagolással és a neurovaszkuláris rendellenességekkel kapcsolatos vizsgálatokban. A HCMEC/D3 azon képessége, hogy magas elektromos ellenállással rendelkező, szoros monoréteget képezzen, aláhúzza alkalmasságukat a BBB permeabilitási vizsgálatokra.

A HCMEC/D3 sejtek felhasználásával végzett kutatások az alkalmazások széles körét fedik le, beleértve az olyan agyi patológiák vizsgálatát, mint a stroke, a szklerózis multiplex és a rák agyi metasztázisának vizsgálata. A különböző molekuláris biológiai technikákkal való kompatibilitásuk miatt kiváló eszköznek bizonyulnak a gyulladásos ingerekre, a nyírási stresszre és a neurotoxikus anyagokra adott endotélsejtválaszok vizsgálatára is. Ez a sejtvonal robusztus, reprodukálható platformot biztosít az agyi endotél szintjén zajló molekuláris események boncolásához, értékes betekintést nyújtva a neurovaszkuláris egészség és betegség összetettségébe.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban