hCMEC/D3

Celična linija HCMEC/D3 je imortalizirana človeška cerebralna mikrovaskularna endotelijska celična linija, ki se pogosto uporablja pri preučevanju krvno-možganske pregrade (BBB). Ta celična linija je bila ustvarjena s transdukcijo primarnih človeških cerebralnih mikrovaskularnih endotelijskih celic z lentivirusnim vektorjem, ki izraža povratno transkriptazo človeške telomeraze (hTERT), ključnega encima za ohranjanje dolžine telomer in s tem spodbujanje celične dolgoživosti brez preoblikovanja fenotipa celic. Uvedba hTERT pomaga tem celicam zaobiti replikativno senescenco, ki omejuje življenjsko dobo primarnih celic, kar omogoča trajno razmnoževanje v kulturi.

Celice HCMEC/D3 ohranijo ključne fiziološke in morfološke značilnosti primarnih možganskih endotelijskih celic, zato so dragocen model za in vitro študije BBB. Mednje sodi izražanje proteinov tesnega spoja, kot so claudin-5, occludin in zonula occludens-1, ki so ključni za ohranjanje celovitosti pregrade. Celice izražajo tudi različne prenašalce in receptorje, značilne za možganski endotelij, kar podpira njihovo uporabo v študijah, povezanih z dostavo zdravil in nevrovaskularnimi motnjami. Sposobnost HCMEC/D3, da tvorijo tesen monosloj z visoko električno upornostjo, poudarja njihovo primernost za preskuse prepustnosti BBB.

Raziskave, ki uporabljajo celice HCMEC/D3, zajemajo širok spekter aplikacij, vključno z raziskovanjem možganskih patologij, kot so možganska kap, multipla skleroza in metastaziranje raka v možgane. Zaradi združljivosti z različnimi tehnikami molekularne biologije so tudi odlično orodje za preučevanje odzivov endotelijskih celic na vnetne dražljaje, strižni stres in nevrotoksične snovi. Ta celična linija zagotavlja zanesljivo in ponovljivo platformo za raziskovanje molekularnih dogodkov na ravni možganskega endotelija, kar prispeva k dragocenim vpogledom v kompleksnost nevrovaskularnega zdravja in bolezni.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo