hCMEC/D3

Bei der HCMEC/D3-Zelllinie handelt es sich um eine immortalisierte humane zerebrale mikrovaskuläre Endothelzelllinie, die bei der Erforschung der Blut-Hirn-Schranke (BHS) ausgiebig eingesetzt wird. Diese Zelllinie wurde durch die Transduktion primärer menschlicher mikrovaskulärer Hirnendothelzellen mit einem lentiviralen Vektor erzeugt, der humane Telomerase-Reverse-Transkriptase (hTERT) exprimiert, ein entscheidendes Enzym für die Aufrechterhaltung der Telomerlänge, das die Langlebigkeit der Zellen fördert, ohne den Phänotyp der Zellen zu verändern. Die Einführung von hTERT hilft diesen Zellen, die replikative Seneszenz zu umgehen, die die Lebensspanne von Primärzellen begrenzt, und ermöglicht eine anhaltende Vermehrung in der Kultur.

HCMEC/D3-Zellen behalten wichtige physiologische und morphologische Merkmale primärer zerebraler Endothelzellen bei, was sie zu einem wertvollen Modell für In-vitro-Studien der BHS macht. Dazu gehört die Expression von Tight-Junction-Proteinen wie Claudin-5, Occludin und Zonula Occludens-1, die für die Aufrechterhaltung der Integrität der Barriere entscheidend sind. Die Zellen exprimieren auch verschiedene Transporter und Rezeptoren, die für das zerebrale Endothel typisch sind, was ihre Verwendung in Studien zur Medikamentenverabreichung und zu neurovaskulären Störungen unterstützt. Die Fähigkeit von HCMEC/D3, einen dichten Monolayer mit hohem elektrischem Widerstand zu bilden, unterstreicht ihre Eignung für Permeabilitätstests der BHS.

Die Forschung mit HCMEC/D3-Zellen deckt ein breites Spektrum von Anwendungen ab, darunter die Untersuchung von Hirnpathologien wie Schlaganfall, Multiple Sklerose und Metastasenbildung von Krebs im Gehirn. Ihre Kompatibilität mit verschiedenen molekularbiologischen Techniken macht sie auch zu einem ausgezeichneten Instrument für die Untersuchung der Reaktionen von Endothelzellen auf Entzündungsreize, Scherstress und neurotoxische Substanzen. Diese Zelllinie bietet eine robuste, reproduzierbare Plattform für die Untersuchung der molekularen Vorgänge auf der Ebene des zerebralen Endothels und trägt so zu wertvollen Erkenntnissen über die Komplexität der neurovaskulären Gesundheit und Krankheit bei.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung