hCMEC/D3

HCMEC/D3 hücre hattı, kan-beyin bariyeri (BBB) çalışmalarında yaygın olarak kullanılan ölümsüzleştirilmiş bir insan serebral mikrovasküler endotel hücre hattını temsil etmektedir. Bu hücre hattı, birincil insan serebral mikrovasküler endotel hücrelerinin, telomer uzunluğunu korumak ve böylece hücre fenotipini dönüştürmeden hücresel uzun ömürlülüğü teşvik etmek için çok önemli bir enzim olan insan telomeraz ters transkriptazını (hTERT) ifade eden bir lentiviral vektör ile transdüksiyonu yoluyla üretilmiştir. HTERT'in eklenmesi, bu hücrelerin birincil hücrelerin ömrünü sınırlayan replikatif yaşlanmayı atlamasına yardımcı olarak kültürde sürekli çoğalmaya izin verir.

HCMEC/D3 hücreleri, birincil serebral endotelyal hücrelerin temel fizyolojik ve morfolojik özelliklerini koruyarak onları BBB'nin in vitro çalışmaları için değerli bir model haline getirmektedir. Bunlar arasında claudin-5, occludin ve zonula occludens-1 gibi bariyer bütünlüğünü korumak için kritik olan sıkı bağlantı proteinlerinin ifadesi yer alır. Hücreler ayrıca serebral endotele özgü çeşitli taşıyıcıları ve reseptörleri ifade ederek ilaç dağıtımı ve nörovasküler bozukluklarla ilgili çalışmalarda kullanımlarını desteklemektedir. HCMEC/D3'ün yüksek elektrik direncine sahip sıkı bir tek tabaka oluşturma kabiliyeti, BBB geçirgenlik deneyleri için uygunluklarının altını çizmektedir.

HCMEC/D3 hücrelerinin kullanıldığı araştırmalar, inme, multipl skleroz ve kanserin beyne metastazı gibi serebral patolojilerin araştırılması da dahil olmak üzere geniş bir uygulama yelpazesini kapsamaktadır. Çeşitli moleküler biyoloji teknikleriyle uyumlulukları da onları enflamatuar uyaranlara, kesme stresine ve nörotoksik maddelere karşı endotel hücre tepkilerini incelemek için mükemmel bir araç haline getirmektedir. Bu hücre hattı, serebral endotel düzeyindeki moleküler olayları incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir platform sağlayarak nörovasküler sağlık ve hastalığın karmaşıklıklarına ilişkin değerli içgörülere katkıda bulunur.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın