hCMEC/D3

Dòng tế bào HCMEC/D3 là một dòng tế bào nội mô mạch máu não người bất tử, được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu về hàng rào máu-não (BBB). Dòng tế bào này được tạo ra thông qua quá trình chuyển gen của các tế bào nội mô mạch máu não người nguyên phát bằng vectơ lentivirus biểu hiện enzym telomerase reverse transcriptase của người (hTERT), một enzym quan trọng trong việc duy trì độ dài telomere và do đó thúc đẩy tuổi thọ tế bào mà không làm thay đổi biểu hiện kiểu hình của tế bào. Việc giới thiệu hTERT giúp các tế bào này vượt qua quá trình lão hóa sinh sản, vốn giới hạn tuổi thọ của các tế bào nguyên phát, cho phép chúng được nuôi cấy liên tục trong môi trường nhân tạo.

Các tế bào HCMEC/D3 duy trì các đặc điểm sinh lý và hình thái học quan trọng của tế bào nội mô mạch máu não nguyên phát, khiến chúng trở thành mô hình quý giá cho các nghiên cứu in vitro về BBB. Điều này bao gồm việc biểu hiện các protein liên kết chặt chẽ như claudin-5, occludin và zonula occludens-1, vốn là yếu tố quan trọng để duy trì tính toàn vẹn của hàng rào. Các tế bào này cũng biểu hiện các vận chuyển và thụ thể đặc trưng của nội mô não, hỗ trợ việc sử dụng chúng trong các nghiên cứu liên quan đến vận chuyển thuốc và rối loạn thần kinh mạch máu. Khả năng của HCMEC/D3 trong việc hình thành một lớp đơn chặt chẽ với điện trở cao nhấn mạnh sự phù hợp của chúng cho các thử nghiệm độ thấm của BBB.

Các nghiên cứu sử dụng tế bào HCMEC/D3 đã bao quát nhiều ứng dụng, bao gồm việc nghiên cứu các bệnh lý não như đột quỵ, xơ cứng rải rác và di căn ung thư đến não. Khả năng tương thích với các kỹ thuật sinh học phân tử cũng khiến chúng trở thành công cụ tuyệt vời để nghiên cứu phản ứng của tế bào nội mô đối với các kích thích viêm, áp lực cắt và các chất độc thần kinh. Dòng tế bào này cung cấp một nền tảng mạnh mẽ, có thể tái tạo để phân tích các sự kiện phân tử ở mức độ nội mô não, góp phần mang lại những hiểu biết quý giá về sự phức tạp của sức khỏe và bệnh lý thần kinh mạch máu.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.