hCMEC/D3

HCMEC/D3細胞株は、血液脳関門（BBB）の研究に広く利用されている不死化ヒト脳微小血管内皮細胞株である。この細胞株は、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素（hTERT）を発現するレンチウイルスベクターを初代ヒト脳微小血管内皮細胞に導入することによって作製された。hTERTの導入により、これらの細胞は初代細胞の寿命を制限する複製老化を回避することができ、培養における持続的な増殖が可能になる。

HCMEC/D3細胞は、初代脳内皮細胞の主要な生理学的および形態学的特徴を保持しており、BBBのin vitro研究にとって貴重なモデルとなっている。これらには、クローディン-5、オクルディン、zonula occludens-1などのタイトジャンクションタンパク質の発現が含まれ、これらはバリアの完全性を維持するために重要である。この細胞はまた、脳内皮に典型的な様々なトランスポーターやレセプターを発現しており、薬物送達や神経血管障害に関連した研究への利用を支持している。HCMEC/D3が高い電気抵抗で強固な単分子膜を形成する能力は、BBB透過性アッセイに適していることを裏付けている。

HCMEC/D3細胞を用いた研究は、脳卒中、多発性硬化症、癌の脳への転移などの脳病態の研究を含む幅広い応用範囲に及んでいる。また、様々な分子生物学的手法に適合することから、炎症刺激、シアストレス、神経毒性物質に対する内皮細胞の応答を研究するための優れたツールとなっている。この細胞株は、脳内皮レベルでの分子事象を解析するための強固で再現性のあるプラットフォームを提供し、神経血管の健康と疾患の複雑さについての貴重な洞察に貢献する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。