hCMEC/D3

HCMEC/D3 šūnu līnija ir imortizēta cilvēka smadzeņu mikrovaskulāro endotēlija šūnu līnija, ko plaši izmanto asins-smadzeņu barjeras (BBB) pētījumos. Šī šūnu līnija tika izveidota, transducējot primārās cilvēka cerebrālo mikrovaskulāro endotēliju šūnas ar lentivīrusu vektoru, kas ekspresē cilvēka telomerāzes reverso transkriptāzi (hTERT), kas ir būtisks enzīms telomēru garuma uzturēšanai un tādējādi veicina šūnu ilgmūžību, nepārveidojot šūnu fenotipu. HTERT ieviešana palīdz šīm šūnām apiet replikatīvo novecošanos, kas ierobežo primāro šūnu dzīves ilgumu, ļaujot tām ilgstoši vairoties kultūrā.

HCMEC/D3 šūnas saglabā galvenās fizioloģiskās un morfoloģiskās primāro smadzeņu endotēlija šūnu īpašības, padarot tās par vērtīgu modeli in vitro BBB pētījumiem. Tās ietver tādu ciešas savienošanās olbaltumvielu kā claudin-5, occludin un zonula occludens-1 ekspresiju, kas ir ļoti svarīgas barjeras integritātes uzturēšanai. Šūnas arī ekspresē dažādus smadzeņu endotēlijam raksturīgus transportierus un receptorus, kas veicina to izmantošanu pētījumos, kas saistīti ar zāļu piegādi un neirovaskulāriem traucējumiem. HCMEC/D3 spēja veidot blīvu monoslāni ar augstu elektrisko pretestību uzsver to piemērotību BBB caurlaidības testiem.

HCMEC/D3 šūnu pētījumi aptver plašu pielietojumu spektru, tostarp smadzeņu patoloģiju, piemēram, insulta, multiplās sklerozes un vēža metastāžu smadzenēs, izpēti. To savietojamība ar dažādām molekulārās bioloģijas metodēm padara tās arī par lielisku līdzekli, lai pētītu endotēlija šūnu reakciju uz iekaisuma stimuliem, bīdes stresu un neirotoksiskām vielām. Šī šūnu līnija nodrošina stabilu, reproducējamu platformu molekulāro notikumu izpētei smadzeņu endotēlija līmenī, sniedzot vērtīgu ieskatu neirovaskulārās veselības un slimību sarežģītībā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu