hCMEC/D3

De HCMEC/D3-cellijn vertegenwoordigt een geïmmortaliseerde menselijke cerebrale microvasculaire endotheelcellijn, die uitgebreid wordt gebruikt bij het bestuderen van de bloed-hersenbarrière (BBB). Deze cellijn werd gegenereerd door transductie van primaire humane cerebrale microvasculaire endotheelcellen met een lentivirale vector die humaan telomerase reverse transcriptase (hTERT) uitdrukt, een cruciaal enzym voor het handhaven van telomeerlengte en daardoor het bevorderen van cellulaire levensduur zonder het fenotype van de cel te veranderen. De introductie van hTERT helpt deze cellen om de replicatieve senescentie, die de levensduur van primaire cellen beperkt, te omzeilen, waardoor duurzame vermeerdering in cultuur mogelijk is.

HCMEC/D3 cellen behouden belangrijke fysiologische en morfologische eigenschappen van primaire cerebrale endotheelcellen, waardoor ze een waardevol model zijn voor in vitro studies van de BBB. Hieronder valt de expressie van tight junction-eiwitten zoals claudine-5, occludine en zonula occludens-1, die essentieel zijn voor het behoud van de integriteit van de barrière. De cellen brengen ook verschillende transporters en receptoren tot expressie die typerend zijn voor het cerebrale endotheel, waardoor ze gebruikt kunnen worden in onderzoeken naar de toediening van medicijnen en neurovasculaire aandoeningen. Het vermogen van HCMEC/D3 om een hechte monolaag te vormen met een hoge elektrische weerstand onderstreept hun geschiktheid voor doorlaatbaarheidstests van de BBB.

Onderzoek met HCMEC/D3 cellen heeft een breed scala aan toepassingen, waaronder het onderzoeken van cerebrale pathologieën zoals beroerte, multiple sclerose en uitzaaiing van kanker naar de hersenen. Door hun compatibiliteit met verschillende moleculaire biologietechnieken zijn ze ook een uitstekend hulpmiddel voor het bestuderen van de respons van endotheelcellen op ontstekingsstimuli, schuifspanning en neurotoxische stoffen. Deze cellijn biedt een robuust, reproduceerbaar platform voor het ontleden van de moleculaire gebeurtenissen op het cerebrale endotheelniveau en draagt zo bij aan waardevolle inzichten in de complexiteit van neurovasculaire gezondheid en ziekte.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring