hCMEC/D3

HCMEC/D3 ląstelių linija yra imortalizuota žmogaus smegenų mikrovaskulinio endotelio ląstelių linija, plačiai naudojama tiriant kraujo ir smegenų barjerą (BBB). Ši ląstelių linija buvo sukurta pirmines žmogaus smegenų mikrovaskulines endotelio ląsteles perleidus lentivirusiniu vektoriumi, ekspresuojančiu žmogaus telomerazės atvirkštinę transkriptazę (hTERT), kuri yra labai svarbus fermentas, palaikantis telomerų ilgį ir taip skatinantis ląstelių ilgaamžiškumą, tačiau nekeičiantis ląstelių fenotipo. HTERT įvedimas padeda šioms ląstelėms apeiti replikacinį senėjimą, kuris riboja pirminių ląstelių gyvavimo trukmę, ir leidžia jas nuolat dauginti kultūroje.

HCMEC/D3 ląstelės išlaiko pagrindines fiziologines ir morfologines pirminių smegenų endotelio ląstelių savybes, todėl jos yra vertingas in vitro BBB tyrimų modelis. Tarp jų yra glaudžios jungties baltymų, tokių kaip claudin-5, occludin ir zonula occludens-1, kurie yra labai svarbūs barjero vientisumui palaikyti, raiška. Ląstelės taip pat ekspresuoja įvairius smegenų endoteliui būdingus pernešėjus ir receptorius, todėl jas galima naudoti atliekant tyrimus, susijusius su vaistų pristatymu ir neurovaskuliniais sutrikimais. HCMEC/D3 gebėjimas sudaryti sandarų monosluoksnį, pasižymintį didele elektrine varža, pabrėžia jų tinkamumą BBB pralaidumo tyrimams.

HCMEC/D3 ląstelės buvo plačiai naudojamos moksliniams tyrimams, įskaitant smegenų patologijų, tokių kaip insultas, išsėtinė sklerozė ir vėžio metastazės smegenyse, tyrimus. Dėl jų suderinamumo su įvairiais molekulinės biologijos metodais jos taip pat yra puikus įrankis tiriant endotelio ląstelių atsaką į uždegiminius dirgiklius, šlyties stresą ir neurotoksines medžiagas. Ši ląstelių linija yra patikima, atkuriama platforma, leidžianti tirti molekulinius įvykius smegenų endotelio lygmenyje ir padedanti įgyti vertingų įžvalgų apie sudėtingą neurovaskulinę sveikatą ir ligas.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime