hCMEC/D3

Клетъчната линия HCMEC/D3 представлява имортезирана човешка церебрална микроваскуларна ендотелна клетъчна линия, широко използвана за изследване на кръвно-мозъчната бариера (КМБ). Тази клетъчна линия е създадена чрез трансдукция на първични човешки мозъчни микроваскуларни ендотелни клетки с лентивирусен вектор, експресиращ човешка теломеразна обратна транскриптаза (hTERT), ключов ензим за поддържане на дължината на теломерите и по този начин за насърчаване на клетъчното дълголетие, без да се трансформира клетъчният фенотип. Въвеждането на hTERT помага на тези клетки да заобиколят репликативното стареене, което ограничава продължителността на живота на първичните клетки, позволявайки устойчиво размножаване в култура.

Клетките HCMEC/D3 запазват основните физиологични и морфологични характеристики на първичните мозъчни ендотелни клетки, което ги прави ценен модел за in vitro изследвания на ВВВ. Те включват експресия на белтъци на плътното съединение, като claudin-5, occludin и zonula occludens-1, които са от решаващо значение за поддържане на целостта на бариерата. Клетките също така експресират различни транспортери и рецептори, типични за мозъчния ендотел, което подкрепя използването им в проучвания, свързани с доставката на лекарства и невросъдовите нарушения. Способността на HCMEC/D3 да образуват стегнат монослой с високо електрическо съпротивление подчертава пригодността им за изследвания на пропускливостта на BBB.

Изследванията, в които се използват HCMEC/D3 клетки, обхващат широк спектър от приложения, включително изследване на мозъчни патологии като инсулт, множествена склероза и метастази на рак в мозъка. Тяхната съвместимост с различни техники на молекулярната биология ги прави отличен инструмент за изследване на отговорите на ендотелните клетки към възпалителни стимули, стрес от срязване и невротоксични вещества. Тази клетъчна линия осигурява стабилна, възпроизводима платформа за изследване на молекулярните събития на ниво мозъчен ендотел, допринасяйки за ценни прозрения за сложността на невросъдовото здраве и болести.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация